Data/hora: 25/06/2024 17:33:41

Biblioteca(s): 	Embrapa Rondônia.	
Data corrente: 	15/10/2009	
Data da última atualização: 	27/09/2022	
Autoria: 	BRITO, L. G.; OLIVEIRA, M. C. de S.; MOURA, M. M. da F.; SILVA NETTO, F. G. da S.; CAVALCANTE, F. A.; MARIM, A. D.; SOUZA, G. C. R. de; SILVA, J. L. da.	
Afiliação: 	Luciana Gatto Brito, Embrapa Rondônia; Márcia Cristina de Sena Oliveira, Embrapa Pecuária Sudeste; Maria Manuela da Fonseca Moura, UNIR; Francelino Goulart da Silva Netto, Embrapa Rondônia; Francisco Aloísio Cavalcante, Embrapa Acre; Adriana Denise Marim.	
Título: 	Extração de DNA a partir de coágulos sanguíneos bovinos.	
Ano de publicação: 	2006	
Fonte/Imprenta: 	Porto Velho: Embrapa Rondônia, 2006.	
Páginas: 	17 p.	
Série: 	(Embrapa Rondônia. Boletim de Pesquisa e Desenvolvimento, 43).	
Idioma: 	Português	
Conteúdo: 	Foi otimizada uma metodologia de extração de DNA genômico a partir de coágulo sanguíneo. Amostras de sangue com e sem anticoagulante EDTA para a obtenção dos coágulos sanguíneos foram coletadas em bovinos nos estados de Rondônia e Acre para pesquisa de Anaplasma marginale. Para a extração de DNA a partir do coágulo sanguíneo testaram-se dois tipos de tecido de nylon: no tratamento 1, o tecido utilizado apresentava diâmetro dos poros de 200 µm e no tratamento 2, tecido com poros de diâmetro de 1.200 µm. As amostras de sangue com anticoagulante representaram o tratamento 3, sendo este considerado como tratamento controle. Após a quebra mecânica, os coágulos sofreram centrifugação a 7.000 RPM por 15 minutos passando através das malhas dos tecidos utilizados nos tratamentos 1 e 2. A extração de DNA das amostras a partir do coágulo centrifugado e do sangue total se deu através da utilização de kit comercial para extração de DNA genômico. A quantificação do DNA obtido foi realizada através de espectrofotometria a 260 e 280 m, sendo sua integridade verificada através de eletroforese em gel de agarose. As amostras de DNA obtidas a partir dos diferentes protocolos foram utilizadas como molde para amplificação, por PCR, do gen msp5 de A. marginale. A quantidade de DNA obtida pelos tratamentos 1 e 2 foi semelhante a do sangue total (33,39 ± 1,17; 31,76 ± 0,663; 32,35 ± 0,676, respectivamente). A pureza do DNA nas amostras obtidas a partir dos tratamentos 1 e 2 foram semelhantes a do sangue total (A260/280 = 1,61 ± 0,068; 1,58 ± 0,035; 1,63 ± 0,028, respectivamente). A utilização de tecidos de organza ou tipo filó se mostrou como uma metodologia apta a ser incorporada como método de rotina para extração de DNA a partir de coágulo sanguíneo bovino por ser uma metodologia simples, rápida, barata e reproduzível para a obtenção de quantidades consideráveis de DNA de boa qualidade para utilização em estudos de epidemiologia molecular em patologias bovinas.	
Palavras-Chave: 	blood clot; bovine diseases; Coágulo sanguíneo; DNA extraction; Doenças de bovinos; Epidemiologia molecular; Extração de DNA.	
Thesaurus Nal: 	molecular epidemiology.	
Categoria do assunto: 	--	
URL: 	http://ainfo.cnptia.embrapa.br/digital/bitstream/item/24667/1/bpd43-dnabovinos.pdf	
Registro original: 	Embrapa Rondônia (CPAF-RO)	
Exemplares: 	CPAF-RO - (14246-1) - UMT - FL - DD -  -  -  - DIS