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Biblioteca(s): | Embrapa Soja.
Data corrente: | 28/10/2005
Data da última atualização: | 01/11/2005
Autoria: | LEMOS, N. G.
Título: | Transformação e qualificação molecular de soja geneticamente modificada com o gene als visando resistência ao herbicida Imazapir.
Ano de publicação: | 2005
Fonte/Imprenta: | 2005.
Páginas: | 96 f.
Idioma: | Português
Notas: | Dissertação (Mestrado em Genética e Biologia Molecular) - Universidade Estadual de Londrina, Londrina.
Conteúdo: | A soja Glycine max (L.) Merrill é uma cultura que foi originária na China e introduzida no ocidente no início do século 20. O Brasil é o segundo maior produtor e exportador de soja no mundo, tendo colhido 52 milhões de toneladas em 2003. Apesar da grande produtividade, o país perde milhões de dólares devido a fatores que interferem no desenvolvimento da cultura, a exemplo das plantas daninhas, que competem pela luz solar, água e nutrientes. O problema com plantas daninhas no Brasil agravou-se com a adoção do monocultivo em grandes extensões de área. Para controlar essas espécies são utilizados os métodos mecânico, cultura e químico. Os herbicidas atuam inibindo a atividade metabólica de componentes celulares e, como consequência desorganizam a produção de várias substâncias essenciais para a sobrevivência das plantas, como lipídios, aminoácidos, inibindo o desenvolvimento celular e do organismo como um todo. O Imazapir é um dos herbicidas utilizados no combate as plantas daninhas, pertence ao grupo químico das Imidazolinonas e pode ser utilizado tanto em pré quanto em pós emergência. Esse herbicida inibe a enzima acetolactato sintase (ALS) ou acetohidroxiácido (AHAS) que participa da biossíntese de aminoácidos essenciais para as plantas. Cientistas conseguiram isolar de uma planta Arabidopsis thaliana uma enzima mutada, possuindo o sítio de ligação ao herbicida modificado, mas contendo as mesmas propriedades catalíticas da enzima nativa. O objetivo desse trabalho foi a obtenção de genótipos em soja Glycine max (L.) Merril geneticamente modificados com esse gene por meio da técnica de biobalística visando resistência ao herbicida Imazapir, e a quantificação molecular desses eventos quanto ao número de cópias e níveis de expressão pela técnica de PCR em Tempo Real. Das 170 plantas regeneradas após a transformação, 11 foram positivas na geração R0. Na geração R1 apenas uma planta foi positiva para o gene de interesse. Quantificações dos níveis de expressão e números de cópias foram feitas com as gerações R2 e R3 dessa planta tornando-se como comparação eventos contendo uma (evento 603) e duas (evento 16) cópias do gene. Os resultados mostraram que os níveis de expressão foram intermediários aos eventos 603 e 16, e na análise do número de cópias apenas 4 amostras ficaram com valores acima da amostra tomada como referência, contendo uma cópia. O evento 603 não serviu como parâmetro adequado para a determinação do número de cópias dos eventos, pois apesar de apresentar apenas um lócus contendo o gene als em análises feitas por Southern Blot, os resultados sugerem que este lócus pode estar composto por várias cópias em "tandem" desse gene.
Palavras-Chave: | Níveis de expressão; PCR em tempo real; Quantificação relativa.
Thesagro: | Genética Molecular; Herbicida; Melhoramento Genético Vegetal; Resistência; Soja.
Categoria do assunto: | --
Registro original: | Embrapa Soja (CNPSO)
Exemplares: | CNPSO - (25700-1) - UPC - TS - -- - 10/05 -  - 10/05 - DIS