Data/hora: 23/09/2024 11:59:53

Biblioteca(s): 	Embrapa Gado de Corte.	
Data corrente: 	07/02/2011	
Data da última atualização: 	07/02/2011	
Autoria: 	FORNER, O.; ROSINHA, G. M. S.; FRAGOSO, S. P.; SANTOS, L. R.; SOARES, C. O.; ARAUJO, F. R.; ELISEI, C.	
Afiliação: 	ODINÉIA FORNER, UFPR; GRACIA MARIA SOARES ROSINHA, CNPGC; FIIOCRUZ; BOLSISTA CNPGC; CLEBER OLIVEIRA SOARES, CNPGC; FLABIO RIBEIRO ARAUJO, CNPGC; BOLSISTA CNPGC.	
Título: 	FagA (Gene de aquisição de ferro) de Corynebacterium pseudotuberculosis como candidato a vacina de dna contra a linfadenite caseosa	
Ano de publicação: 	2010	
Fonte/Imprenta: 	In: JORNADA CIENTÍFICA DA EMBRAPA GADO DE CORTE, 6., 2010, Campo Grande, MS. Ética na pesquisa científica: [Anais da ...]. Campo Grande, MS: Embrapa Gado de Corte, 2010. 1 CD-ROM. Coordenadora: Vanessa Felipe de Souza	
Páginas: 	1 p.	
Idioma: 	Português	
Conteúdo: 	A linfadenite caseosa (LC) é uma doença que acomete ovinos e caprinos, causada pela bactéria Corynebacterium pseudotuberculosis. Ainda não há uma imunoprofilaxia eficiente contra este patógeno, provavelmente pelo escasso conhecimento de seus fatores de virulência. O gene fagA codifica uma proteína de membrana envolvida na aquisição de ferro para bactéria. Este gene foi identificado a partir da imunovarredura de uma biblioteca genômica de C. pseudotuberculosis utilizando soros de ovinos infectados com este patógeno, sugerindo o fagA como um bom candidato a antígeno vacinal. O objetivo neste trabalho foi construir um plasmídeo vacinal com o gene fagA e determinar a presença de mensagem para este gene em músculos de camundongos inoculados e em células de mamíferos COS-7 transfectadas com o plasmídeo vacinal denominado fagApcDNA. Primers foram desenhados para o gene fagA, gerando um fragmento de 1068 pb que foi clonado no vetor pcDNA3.1+ (Invitrogen®), transformado em cepas de Escherichia coli DH5? e purificado com Endofree Plasmid Giga KitTM (QIAGEN®). Para detecção de mensagem para fagA dois experimentos foram realizados. No primeiro, dois camundongos da linhagem Balb-C, com 9 semanas, receberam uma injeção intramuscular de 100 ?g de fagApcDNA, sendo um deles eutanasiado após 48 horas (M1) e o outro após 72 horas (M2) de inoculação. Depois, 100 mg do tecido alvo da injeção foram retirados e macerados com trizol. No segundo experimento, células COS-7 foram transfectadas com 2 ?g de fagApcDNA misturado ao reagente Cellfectin (Invitrogen®). Em seguida, as células foram ressuspensas em trizol e posteriormente, células e tecido foram processados para obtenção do RNA total, usado na detecção da mensagem para fagA por RT-PCR (ImProm-II? Reverse Transcription System ? Promega®). Como resultado preliminar, verificou-se a expressão de fagA apenas em M1. Porém, novos experimentos serão realizados para confirmar fagApcDNA como um bom candidato para uma vacina de DNA contra a LC.	
Palavras-Chave: 	Caprinos; Ovinos.	
Thesagro: 	Corynebacterium Pseudotuberculosis.	
Categoria do assunto: 	--	
Registro original: 	Embrapa Gado de Corte (CNPGC)	
Exemplares: 	CNPGC - (13620-1) - UPC - PL - DD - CD-142 - JOR -  - DIS