| |
|
|
|
Registro Completo |
|
Biblioteca(s): |
Embrapa Arroz e Feijão; Embrapa Meio-Norte; Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia. |
|
Data corrente: |
05/09/1997 |
|
Data da última atualização: |
19/12/2006 |
|
Autoria: |
ARAGÃO, F. J. L. |
|
Título: |
Transformação genética do feijoeiro (Phaseolus vulgaris L.) visando a introdução e expressão de genes de interesse agronômico. |
|
Ano de publicação: |
1996 |
|
Fonte/Imprenta: |
1996. |
|
Páginas: |
198 p. |
|
Idioma: |
Português |
|
Notas: |
Tese (Doutorado em Biologia Molecular) - Universidade de Brasília, Departamento de Biologia Celular, Brasília, DF. |
|
Conteúdo: |
A engenharia genética possibilita a transferência de características para as diferentes espécies. Nos últimos anos várias características novas têm sido introduzi das em plantas comercialmente importantes, produzindo novas cultivares que não poderiam ser obtidas através dos cruzamentos convencionais.
A presente tese é composta de uma série de artigos, cujos resumos são apresentados a seguir:
Com o objetivo de desenvolver um protocolo eficiente de transformação de feijão através do sistema de Agrobacterium, a susceptibilidade de cultivares de Phaseolus vulgaris e P. accutifolios a seis genótipos de A. tumefacies e A. rhizogenes foi avaliada. Os resultados mostraram que a virulência das cepas de Agrobacterium foi dependente do genótipo. Em geral, os sintomas foram mais marcantes em feijão (P. vulgaris) que em tepari (P. accutifolios). Análises de PCR mostraram que os tumores derivados da infecção com agrobacterium eram transgênicos. Meristemas apicais de feijão cv Jalo foram bombardeados com micropartículas e inoculados com A. tumefaciens Ach5. Após um mês, os explantes mostraram uma alta fteqüência de formação de tumor (50-70%). Resultados similares foram obtidos coma cepa desarmada de A. tumefaciens LBA4404/p35SGUSINT. Um mês após o bombardeamento, a região apical mostrou grandes setores com atividade da enzima GUS, sugerindo estarem transformados.
Foram avaliados os parâmetros que influenciam a expressão transiente do gene gus em eixos embrionários, cotilédones, meristemas apicais e folhas de feijão, após a introdução dos genes através da aceleração de partículas. Um método para recobrir partículas de ouro com o DNA, utilizando cálcio e espermidina, foi desenvolvido, resultando em uma grande expressão do gene gus, superior ao método que utiliza fosfato de cálcio. A concentração do DNA, distância entre a câmara de descarga e a tela de retenção e o vácuo também influenciaram na introdução dos genes. Através de microscopia eletrônica, foi possível localizar as partículas no interior das células. Através de imunolocalização, pôde-se confirmar a expressão do gene introduzido, verificando-se que o produto gênico estava distribuído no citoplasma.
Através do processo biobalístico, foram obtidas plantas transgênicas de feijão. A co-transformação foi avaliada, utilizando-se a fusão gus-nptIl (no plasmídio pBI426), o genes da albumina 2S (no plasmídio pEA23) e os genes do BGMV, ACl, AC2, AC3 e BCl (no plasmídio pAC123BCI-BZ). Os resultados mostraram que a fteqüência de co-transformação variou de 40-50% para os genes em plasmídios separados e foi de 100% para os genes presentes em um mesmo plasmídio. A herança do genes introduzidos mostrou um padrão Mendeliano para a maioria das linhagens. Análises de PCR e Southern blot, confirmaram a integração do genes introduzidos ao genoma vegetal.
Alguns aspectos que influenciam a obtenção de plantas transgênicas de feijão foram estudados. A morfologia do ápice meristemático de 17 cultivares de grupo Carioca e Jalo foi analisada. Alguns cultivares mostraram a região meristemática total ou parcialmente coberta pelos primórdios foliares. As cultivares que apresentaram a região meristemática 100% exposta foram utilizadas nos estudos de indução de multibrotação em presença de BAP (nas concentrações de 4,4 J.lM, 22,2 JlM e 44.4 J.lM). A cultivar PF9029984 apresentou uma multibrotação prolífica. As etapas iniciais da multibrotação na região meristemática apical foram estudadas através da microscopia eletr{!nica de varredura. Plantas transgênicas do cultivar Carioca foram obtidas através do processo biobalístico. A segregação do gene introduzido seguiu as leis de Mendel em todas as linhagens. Análises de Southern blot confirmaram a integração dos genes introduzidos ao genoma das plantas.
Sementes de feijão (cvs. Carioca e Jalo ) e soja (cvs. Davis, Doko, Eureka, Cariri, BR-15 e Cristalina) foram bombardeadas com os dois componentes (A e B) clonados, do vírus do mosaico dourado do feijoeiro (BGMV) isolados do Brasil. Os cultivares de feijão: Carioca e Jalo e de soja, Davis e Cariri, apresentaram sintomas típicos de mosaico dourado. A presença do vírus na planta foi confirmada através de "squash blot hybridization".
Os genes ACI-2-3 e BC do bean golden mosaic virus foram clonados em antisense, sob o controle do promotor 35S CaMV. Esta construção foi utilizada para transformar plantas de feijão através do processo biobalístico. As plantas transgênicas, na geração R3 e R4 foram desafiadas contra o vírus, inoculado através de mosca branca. Os resultados mostraram uma atenuação e retardamento dos sintomas nas plantas transgênicas contendo as seqüências virais em antisense.
O genes da albumina 2S de castanha-do-Pará foi introduzido em plantas de feijão, com o objetivo de avaliar o potencial da expressão de uma proteína de reserva em leguminosa, coma a finalidade de alterar seu valor nutricional. Neste trabalhos, mostramos que o gene da albumina 2S, uma proteína rica em metionina, foi corretamente expresso, sob o controle do promotor 35S CaMV e transmitido para a progênie. Em duas linhagens verificou-se um aumento no teor de metionina de 11 a 15% sobre o encontrado nas plantas não transformadas. MenosA engenharia genética possibilita a transferência de características para as diferentes espécies. Nos últimos anos várias características novas têm sido introduzi das em plantas comercialmente importantes, produzindo novas cultivares que não poderiam ser obtidas através dos cruzamentos convencionais.
A presente tese é composta de uma série de artigos, cujos resumos são apresentados a seguir:
Com o objetivo de desenvolver um protocolo eficiente de transformação de feijão através do sistema de Agrobacterium, a susceptibilidade de cultivares de Phaseolus vulgaris e P. accutifolios a seis genótipos de A. tumefacies e A. rhizogenes foi avaliada. Os resultados mostraram que a virulência das cepas de Agrobacterium foi dependente do genótipo. Em geral, os sintomas foram mais marcantes em feijão (P. vulgaris) que em tepari (P. accutifolios). Análises de PCR mostraram que os tumores derivados da infecção com agrobacterium eram transgênicos. Meristemas apicais de feijão cv Jalo foram bombardeados com micropartículas e inoculados com A. tumefaciens Ach5. Após um mês, os explantes mostraram uma alta fteqüência de formação de tumor (50-70%). Resultados similares foram obtidos coma cepa desarmada de A. tumefaciens LBA4404/p35SGUSINT. Um mês após o bombardeamento, a região apical mostrou grandes setores com atividade da enzima GUS, sugerindo estarem transformados.
Foram avaliados os parâmetros que influenciam a expressão transiente do gene gus em eixos embrionários, cotilédones, meristemas ... Mostrar Tudo |
|
Palavras-Chave: |
Bean; Biobalística; Desenvolvimento de protocolo; Feijao: Genatica; Phaseolus vulgaris L; Plantas transgênicas; Transformação genética. |
|
Thesagro: |
Engenharia Genética; Feijão; Genética; Phaseolus Vulgaris. |
|
Thesaurus Nal: |
Agrobacterium; genetic transformation. |
|
Categoria do assunto: |
-- |
|
Marc: |
LEADER 06311nam a2200289 a 4500
001 1185874
005 2006-12-19
008 1996 bl uuuu m 00u1 u #d
100 1 $aARAGÃO, F. J. L.
245 $aTransformação genética do feijoeiro (Phaseolus vulgaris L.) visando a introdução e expressão de genes de interesse agronômico.
260 $a1996.$c1996
300 $a198 p.
500 $aTese (Doutorado em Biologia Molecular) - Universidade de Brasília, Departamento de Biologia Celular, Brasília, DF.
520 $aA engenharia genética possibilita a transferência de características para as diferentes espécies. Nos últimos anos várias características novas têm sido introduzi das em plantas comercialmente importantes, produzindo novas cultivares que não poderiam ser obtidas através dos cruzamentos convencionais. A presente tese é composta de uma série de artigos, cujos resumos são apresentados a seguir: Com o objetivo de desenvolver um protocolo eficiente de transformação de feijão através do sistema de Agrobacterium, a susceptibilidade de cultivares de Phaseolus vulgaris e P. accutifolios a seis genótipos de A. tumefacies e A. rhizogenes foi avaliada. Os resultados mostraram que a virulência das cepas de Agrobacterium foi dependente do genótipo. Em geral, os sintomas foram mais marcantes em feijão (P. vulgaris) que em tepari (P. accutifolios). Análises de PCR mostraram que os tumores derivados da infecção com agrobacterium eram transgênicos. Meristemas apicais de feijão cv Jalo foram bombardeados com micropartículas e inoculados com A. tumefaciens Ach5. Após um mês, os explantes mostraram uma alta fteqüência de formação de tumor (50-70%). Resultados similares foram obtidos coma cepa desarmada de A. tumefaciens LBA4404/p35SGUSINT. Um mês após o bombardeamento, a região apical mostrou grandes setores com atividade da enzima GUS, sugerindo estarem transformados. Foram avaliados os parâmetros que influenciam a expressão transiente do gene gus em eixos embrionários, cotilédones, meristemas apicais e folhas de feijão, após a introdução dos genes através da aceleração de partículas. Um método para recobrir partículas de ouro com o DNA, utilizando cálcio e espermidina, foi desenvolvido, resultando em uma grande expressão do gene gus, superior ao método que utiliza fosfato de cálcio. A concentração do DNA, distância entre a câmara de descarga e a tela de retenção e o vácuo também influenciaram na introdução dos genes. Através de microscopia eletrônica, foi possível localizar as partículas no interior das células. Através de imunolocalização, pôde-se confirmar a expressão do gene introduzido, verificando-se que o produto gênico estava distribuído no citoplasma. Através do processo biobalístico, foram obtidas plantas transgênicas de feijão. A co-transformação foi avaliada, utilizando-se a fusão gus-nptIl (no plasmídio pBI426), o genes da albumina 2S (no plasmídio pEA23) e os genes do BGMV, ACl, AC2, AC3 e BCl (no plasmídio pAC123BCI-BZ). Os resultados mostraram que a fteqüência de co-transformação variou de 40-50% para os genes em plasmídios separados e foi de 100% para os genes presentes em um mesmo plasmídio. A herança do genes introduzidos mostrou um padrão Mendeliano para a maioria das linhagens. Análises de PCR e Southern blot, confirmaram a integração do genes introduzidos ao genoma vegetal. Alguns aspectos que influenciam a obtenção de plantas transgênicas de feijão foram estudados. A morfologia do ápice meristemático de 17 cultivares de grupo Carioca e Jalo foi analisada. Alguns cultivares mostraram a região meristemática total ou parcialmente coberta pelos primórdios foliares. As cultivares que apresentaram a região meristemática 100% exposta foram utilizadas nos estudos de indução de multibrotação em presença de BAP (nas concentrações de 4,4 J.lM, 22,2 JlM e 44.4 J.lM). A cultivar PF9029984 apresentou uma multibrotação prolífica. As etapas iniciais da multibrotação na região meristemática apical foram estudadas através da microscopia eletr{!nica de varredura. Plantas transgênicas do cultivar Carioca foram obtidas através do processo biobalístico. A segregação do gene introduzido seguiu as leis de Mendel em todas as linhagens. Análises de Southern blot confirmaram a integração dos genes introduzidos ao genoma das plantas. Sementes de feijão (cvs. Carioca e Jalo ) e soja (cvs. Davis, Doko, Eureka, Cariri, BR-15 e Cristalina) foram bombardeadas com os dois componentes (A e B) clonados, do vírus do mosaico dourado do feijoeiro (BGMV) isolados do Brasil. Os cultivares de feijão: Carioca e Jalo e de soja, Davis e Cariri, apresentaram sintomas típicos de mosaico dourado. A presença do vírus na planta foi confirmada através de "squash blot hybridization". Os genes ACI-2-3 e BC do bean golden mosaic virus foram clonados em antisense, sob o controle do promotor 35S CaMV. Esta construção foi utilizada para transformar plantas de feijão através do processo biobalístico. As plantas transgênicas, na geração R3 e R4 foram desafiadas contra o vírus, inoculado através de mosca branca. Os resultados mostraram uma atenuação e retardamento dos sintomas nas plantas transgênicas contendo as seqüências virais em antisense. O genes da albumina 2S de castanha-do-Pará foi introduzido em plantas de feijão, com o objetivo de avaliar o potencial da expressão de uma proteína de reserva em leguminosa, coma a finalidade de alterar seu valor nutricional. Neste trabalhos, mostramos que o gene da albumina 2S, uma proteína rica em metionina, foi corretamente expresso, sob o controle do promotor 35S CaMV e transmitido para a progênie. Em duas linhagens verificou-se um aumento no teor de metionina de 11 a 15% sobre o encontrado nas plantas não transformadas.
650 $aAgrobacterium
650 $agenetic transformation
650 $aEngenharia Genética
650 $aFeijão
650 $aGenética
650 $aPhaseolus Vulgaris
653 $aBean
653 $aBiobalística
653 $aDesenvolvimento de protocolo
653 $aFeijao: Genatica
653 $aPhaseolus vulgaris L
653 $aPlantas transgênicas
653 $aTransformação genética
Download
Esconder MarcMostrar Marc Completo |
|
Registro original: |
Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia (CENARGEN) |
|
|
Biblioteca |
ID |
Origem |
Tipo/Formato |
Classificação |
Cutter |
Registro |
Volume |
Status |
URL |
Voltar
|
|
|
Registro Completo
|
Biblioteca(s): |
Embrapa Acre. |
|
Data corrente: |
18/09/2008 |
|
Data da última atualização: |
28/07/2021 |
|
Tipo da produção científica: |
Artigo em Periódico Indexado |
|
Circulação/Nível: |
Nacional - B |
|
Autoria: |
PEREIRA, J. E. S.; MACIEL, T. M. S.; COSTA, F. H. da S.; PEREIRA, M. A. A. |
|
Afiliação: |
JONNY EVERSON SCHERWINSKI PEREIRA, CPAF-AC; TISSIANE MARIA SILVA MACIEL, Bolsista PIBIC/CNPq; FREDERICO HENRIQUE DA SILVA COSTA, Universidade Federal de Lavras (Ufla); MARIA APARECIDA ALVES PEREIRA, Bolsista PIBIC/CNPq. |
|
Título: |
Germinação in vitro de embriões zigóticos de murumuru (Astrocaryum ulei). |
|
Ano de publicação: |
2006 |
|
Fonte/Imprenta: |
Ciência e Agrotecnologia, Lavras, v. 30, n. 2, p. 251-256, mar./abr. 2006. |
|
ISSN: |
1413-7054 |
|
Idioma: |
Português |
|
Conteúdo: |
Com o presente trabalho objetivou-se avaliar a influência de concentrações de sacarose e a idade fisiológica da semente na germinação in vitro de embriões zigóticos de murmuru. Frutos em dois estágios de desenvolvimento coletados de plantas do campo tiveram os embriões excisados, desinfestados e inoculados em meio de cultura de MS com 75% das concentrações de sais, suplementado com 2,5 g.L-1 de ácido giberélico e diferentes concentrações de sacarose: 15, 30 e 45 g.L-1. Em sala de crescimento, o material foi mantido por 30 dias no escuro, sendo transferido em seguida para condições luminosas de 30 me.m-2.s-1, temperatura de 25±2ºC e fotoperíodo de 16 horas para completo desenvolvimento. O delineamento estatístico utilizado foi inteiramente casualizado em arranjo fatorial 2 x 3, com seis repetições e cinco embriões por parcela. Após 30 dias foi avaliada a porcentagem de germinação e altura das plântulas. Verificou-se que embriões provenientes de frutos imaturos apresentaram maior porcentagem de germinação, sendo a concentração de 30 g.L-1 de sacarose a que proporcionou os melhores resultados dentre as demais testadas. Embriões provenientes de frutos maduros apresentaram altura de plântulas significativamente maior aos imaturos e também para essa variável, a concentração de 30 g.L-1 de sacarose foi a que proporcionou os melhores resultados. |
|
Palavras-Chave: |
Acre; Amazonia Occidental; Amazônia Ocidental; Cultivo in vitro; Desempeño del crecimiento; Embrapa Acre; Etapa de maduración; Fitomejoramiento; Germinación de las semillas; Micropropagación; Rio Branco (AC); Semillas; Sucrosa; Western Amazon. |
|
Thesagro: |
Astrocaryum murumuru; Cultura in vitro; Fator de crescimento; Germinação; Idade; Micropropagação; Murumuru; Reprodução vegetal; Sacarose; Semente. |
|
Thesaurus NAL: |
Astrocaryum; Growth performance; In vitro culture; Maturity stage; Micropropagation; Plant breeding; Seed germination; Seeds; Sucrose. |
|
Categoria do assunto: |
G Melhoramento Genético |
|
URL: |
https://ainfo.cnptia.embrapa.br/digital/bitstream/item/161702/1/19167.pdf
|
|
Marc: |
LEADER 02962naa a2200565 a 4500
001 1509498
005 2021-07-28
008 2006 bl uuuu u00u1 u #d
022 $a1413-7054
100 1 $aPEREIRA, J. E. S.
245 $aGerminação in vitro de embriões zigóticos de murumuru (Astrocaryum ulei).$h[electronic resource]
260 $c2006
520 $aCom o presente trabalho objetivou-se avaliar a influência de concentrações de sacarose e a idade fisiológica da semente na germinação in vitro de embriões zigóticos de murmuru. Frutos em dois estágios de desenvolvimento coletados de plantas do campo tiveram os embriões excisados, desinfestados e inoculados em meio de cultura de MS com 75% das concentrações de sais, suplementado com 2,5 g.L-1 de ácido giberélico e diferentes concentrações de sacarose: 15, 30 e 45 g.L-1. Em sala de crescimento, o material foi mantido por 30 dias no escuro, sendo transferido em seguida para condições luminosas de 30 me.m-2.s-1, temperatura de 25±2ºC e fotoperíodo de 16 horas para completo desenvolvimento. O delineamento estatístico utilizado foi inteiramente casualizado em arranjo fatorial 2 x 3, com seis repetições e cinco embriões por parcela. Após 30 dias foi avaliada a porcentagem de germinação e altura das plântulas. Verificou-se que embriões provenientes de frutos imaturos apresentaram maior porcentagem de germinação, sendo a concentração de 30 g.L-1 de sacarose a que proporcionou os melhores resultados dentre as demais testadas. Embriões provenientes de frutos maduros apresentaram altura de plântulas significativamente maior aos imaturos e também para essa variável, a concentração de 30 g.L-1 de sacarose foi a que proporcionou os melhores resultados.
650 $aAstrocaryum
650 $aGrowth performance
650 $aIn vitro culture
650 $aMaturity stage
650 $aMicropropagation
650 $aPlant breeding
650 $aSeed germination
650 $aSeeds
650 $aSucrose
650 $aAstrocaryum murumuru
650 $aCultura in vitro
650 $aFator de crescimento
650 $aGerminação
650 $aIdade
650 $aMicropropagação
650 $aMurumuru
650 $aReprodução vegetal
650 $aSacarose
650 $aSemente
653 $aAcre
653 $aAmazonia Occidental
653 $aAmazônia Ocidental
653 $aCultivo in vitro
653 $aDesempeño del crecimiento
653 $aEmbrapa Acre
653 $aEtapa de maduración
653 $aFitomejoramiento
653 $aGerminación de las semillas
653 $aMicropropagación
653 $aRio Branco (AC)
653 $aSemillas
653 $aSucrosa
653 $aWestern Amazon
700 1 $aMACIEL, T. M. S.
700 1 $aCOSTA, F. H. da S.
700 1 $aPEREIRA, M. A. A.
773 $tCiência e Agrotecnologia, Lavras$gv. 30, n. 2, p. 251-256, mar./abr. 2006.
Download
Esconder MarcMostrar Marc Completo |
|
Registro original: |
Embrapa Acre (CPAF-AC) |
|
|
Biblioteca |
ID |
Origem |
Tipo/Formato |
Classificação |
Cutter |
Registro |
Volume |
Status |
Fechar
|
| Nenhum registro encontrado para a expressão de busca informada. |
|
|
