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Registro Completo |
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Biblioteca(s): |
Embrapa Agropecuária Oeste. |
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Data corrente: |
14/07/2003 |
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Data da última atualização: |
14/07/2003 |
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Autoria: |
CASTRO, M. E. B. de; RIBEIRO, Z. M. de A.; SOUZA, M. L. de. |
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Título: |
Susceptibilidade de diferentes linhagens celulares de insetos ao nucleopoliedrovirus de Anticarsia gemmatalis. |
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Ano de publicação: |
2002 |
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Fonte/Imprenta: |
Brasília: Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia, 2001. |
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Páginas: |
18 p. |
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Série: |
(Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia. Boletim de Pesquisa e Desenvolvimento, 15). |
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Idioma: |
Português |
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Conteúdo: |
O baculovirus AgMNPV, Nucleopoliedrovirus de Anticarsia gemmatalis, tem sido aplicado no Brasil como bioinseticida para controlar a lagarta da soja Anticarsia gemmatalis. Embora esse vírus seja muito específico para seu hospedeiro natural, cultura de células tem sido requerida para selecionar sistemas produtivos e desenvolver estudos sobre regulação gênica.Neste trabalho a susceptilidade de diferentes células ao AgMNPV foi investigada. Os efeitos citopáticos induzidos pelo vírus e a produção de partículas virais foram examinados e comparados nas seguintes linhagens celulares: Anticarsia gemmatalis (UFL-AG-286), Trichoplusia ni (Tn-5B1-4 e Tn-368), Spodoptera frugiperda (IPLB-SF-21AE e SF9), Lymantria dispar (Ld652Y) e Bombyx mori (BM-5). Células foram cultivadas em meio TNMFH suplementado com soro bovino fetal, a 27°C. Foram semeadas 2,5x10 elevado a 6 células em placas de cultura 60mm quadrado e inoculadas com vírus em uma multiplicidade de infecção (MOI) de 10 pfu por célula. Em diferentes tempos após infecção (0, 12, 24, 48, 72 e 96 h p.i.) as células foram examinadas por microscópio de contraste de fase. Em geral, a 12 h p.i. já se observava arredondamento celular e hipertrofia nuclear. Algumas protusões celulares foram detectadas 24 h p.i. porém desapareceram após 72 horas de infecção. Corpos poliédricos de inclusão (PIBs) foram então observados em torno de 48 h p.i. e aumentaram em número durante os períodos subsequentes da infecção. Contudo poliedros não foram visualizados em células Ld652Y e BM-5. Além disso, células BM-5 sofreram intensa lise após incubação com AgMNPV. Em 96 horas de infecção, 70% dessas células estavam lisadas. Análise por microscopia de luz, 96 h p.i., mostrou que o número de células produzindo poliedros alcançou 95% a 100% em ambas células Tn-5B1-4 e UFL-AG-286. Células SF-21, Tn-368 e SF9 também alcançaram 70%, 40% e 25%, respectivamente. Medidas de títulos virais (BV) pelo método da diluição final mostraram que células Tn-5B1-4, UFL-AG-286 e SF21 foram altamente produtivas, com valores de TCID em torno de 10 elevado a 7 IU/ml, 48 h p.i. Por outro lado, células SF9 e Tn368 apresentaram títulos virais de 10 elevado a 6 IU/ml, consistentes com a baixa formação de poliedros observada. Como esperado, a medida dos títulos virais em células Ld652Y e BM-5 foi similar a dos níveis basais (10 elevado a 4 a 10 elevado a 5 IU/ml). MenosO baculovirus AgMNPV, Nucleopoliedrovirus de Anticarsia gemmatalis, tem sido aplicado no Brasil como bioinseticida para controlar a lagarta da soja Anticarsia gemmatalis. Embora esse vírus seja muito específico para seu hospedeiro natural, cultura de células tem sido requerida para selecionar sistemas produtivos e desenvolver estudos sobre regulação gênica.Neste trabalho a susceptilidade de diferentes células ao AgMNPV foi investigada. Os efeitos citopáticos induzidos pelo vírus e a produção de partículas virais foram examinados e comparados nas seguintes linhagens celulares: Anticarsia gemmatalis (UFL-AG-286), Trichoplusia ni (Tn-5B1-4 e Tn-368), Spodoptera frugiperda (IPLB-SF-21AE e SF9), Lymantria dispar (Ld652Y) e Bombyx mori (BM-5). Células foram cultivadas em meio TNMFH suplementado com soro bovino fetal, a 27°C. Foram semeadas 2,5x10 elevado a 6 células em placas de cultura 60mm quadrado e inoculadas com vírus em uma multiplicidade de infecção (MOI) de 10 pfu por célula. Em diferentes tempos após infecção (0, 12, 24, 48, 72 e 96 h p.i.) as células foram examinadas por microscópio de contraste de fase. Em geral, a 12 h p.i. já se observava arredondamento celular e hipertrofia nuclear. Algumas protusões celulares foram detectadas 24 h p.i. porém desapareceram após 72 horas de infecção. Corpos poliédricos de inclusão (PIBs) foram então observados em torno de 48 h p.i. e aumentaram em número durante os períodos subsequentes da infecção. Contudo poliedros não foram visual... Mostrar Tudo |
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Palavras-Chave: |
Bioinseticida. |
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Thesagro: |
Anticarsia Gemmatalis; Baculovirus; Controle Biológico; Lagarta; Vírus. |
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Categoria do assunto: |
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Marc: |
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