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Registro Completo |
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Biblioteca(s): |
Embrapa Florestas. |
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Data corrente: |
28/11/2013 |
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Data da última atualização: |
24/02/2016 |
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Tipo da produção científica: |
Orientação de Tese de Pós-Graduação |
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Autoria: |
OLIVEIRA, C. de. |
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Título: |
Organogênese in vitro e transformação genética de Eucalyptus grandis x Eucalyptus urophylla via Agrobacterium tumefaciens. |
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Ano de publicação: |
2013 |
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Fonte/Imprenta: |
2013. |
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Páginas: |
102 f. |
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Idioma: |
Português |
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Notas: |
Dissertação (Mestrado em Ciências) - Setor de Ciências Agrárias, Universidade Federal do Paraná, Curitiba. Orientadora: Marguerite G.G. Quoirin; Co-orientadora: Juliana Degenhardt-Goldbach. |
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Conteúdo: |
Eucalyptus grandis x E. urophylla se destaca em plantios brasileiros devido às características que herdou de seus parentais, como qualidade da madeira para a produção de papel e celulose. O objetivo deste trabalho foi desenvolver um protocolo de organogênese indireta com explantes foliares e aperfeiçoar aspectos da transformação genética mediante co-cultura com Agrobacterium tumefaciens. Para estabelecer o protocolo de organogênese indireta, na fase de calogênese, testaram-se diferentes concentrações de ANA e, em seguida, de TDZ combinado com ANA ou com 2,4-D no meio de cultura JADS por 30 dias, seguido de subcultura em meio de regeneração, contendo 5,0 ?M de BAP e 0,5 ?M de ANA por mais 30 dias. Nesses meios, os explantes tiveram alta oxidação. A fim de diminuir a oxidação, diferentes meios de cultura foram comparados: WPM, MS, JADS e QL. Obteve-se a maior porcentagem de regeneração e menor taxa de oxidação após cultura em meio WPM seguido de transferência a meio de regeneração. Assim, testaram-se ANA e 2,4-D combinado com TDZ, e em seguida, TDZ e BAP combinado com ANA no meio de cultura WPM. O tratamento mais eficiente em termos de regeneração de gemas foi o meio de cultura WPM e a combinação de 0,25 ?M de TDZ e 0,1 ?M de ANA por 30 dias para a calogênese e, em seguida, 5,0 ?M de BAP e de 0,5?M de ANA por outros 30 dias. Este protocolo proporcionou uma regeneração de brotos de até 46%, com uma baixa oxidação dos tecidos. Observou-se que a idade das brotações utilizadas como fonte de explantes não tinha efeito sobre a organogênese e que pode-se utilizar explantes de 3, 4 ou 5 semanas na última subcultura. Para determinar as concentrações dos agentes seletivos que seriam utilizadas durante a transformação genética, testaram-se diferentes concentrações de canamicina, glufosinato de amônio e manose combinada com sacarose. Os resultados mostraram que se deve iniciar a seleção das plantas transformadas com o gene nptII em 12,5 mg L-1 de canamicina; para plantas transformadas com o gene bar em 0,5 mg L-1 de glufosinato de amônio; para plantas transformadas com o gene pmi em 22,5 g de sacarose e 7,5 g de manose. Experimento visando testar Augmentin® e cefotaxima na eliminação de Agrobacterium tumefaciens também foi realizado. Na presença de Augmentin, os explantes formaram calos brancos e não oxidados, enquanto que, na presença de cefotaxima, os calos oxidaram. Para diminuir a oxidação imediata dos explantes transformados com o gene bar, esses foram deixados um mês sem glufosinato de amônio após a co-cultura, enquanto que no controle os explantes ficaram em meio de cultura com o agente seletivo. Neste experimento, todos os explantes do controle oxidaram e necrosaram, não formando calos, enquanto que os explantes que foram mantidos um mês sem glufosinato de amônio formaram calos. No entanto não houve regeneração de gemas o que impediu avaliar a eficiência da transformação genética. Além da transformação de explantes foliares com o gene bar, realizou-se transformação com o gene nptII, a qual originou brotações resistentes a 50 mg L-1 de canamicina. MenosEucalyptus grandis x E. urophylla se destaca em plantios brasileiros devido às características que herdou de seus parentais, como qualidade da madeira para a produção de papel e celulose. O objetivo deste trabalho foi desenvolver um protocolo de organogênese indireta com explantes foliares e aperfeiçoar aspectos da transformação genética mediante co-cultura com Agrobacterium tumefaciens. Para estabelecer o protocolo de organogênese indireta, na fase de calogênese, testaram-se diferentes concentrações de ANA e, em seguida, de TDZ combinado com ANA ou com 2,4-D no meio de cultura JADS por 30 dias, seguido de subcultura em meio de regeneração, contendo 5,0 ?M de BAP e 0,5 ?M de ANA por mais 30 dias. Nesses meios, os explantes tiveram alta oxidação. A fim de diminuir a oxidação, diferentes meios de cultura foram comparados: WPM, MS, JADS e QL. Obteve-se a maior porcentagem de regeneração e menor taxa de oxidação após cultura em meio WPM seguido de transferência a meio de regeneração. Assim, testaram-se ANA e 2,4-D combinado com TDZ, e em seguida, TDZ e BAP combinado com ANA no meio de cultura WPM. O tratamento mais eficiente em termos de regeneração de gemas foi o meio de cultura WPM e a combinação de 0,25 ?M de TDZ e 0,1 ?M de ANA por 30 dias para a calogênese e, em seguida, 5,0 ?M de BAP e de 0,5?M de ANA por outros 30 dias. Este protocolo proporcionou uma regeneração de brotos de até 46%, com uma baixa oxidação dos tecidos. Observou-se que a idade das brotações utilizadas com... Mostrar Tudo |
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Palavras-Chave: |
Espécie exótica; Espécie florestal; Melhoramento genético. |
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Thesagro: |
Cultura de Tecido; Eucalipto; Organogénese; Planta Transgênica. |
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Categoria do assunto: |
-- |
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520 $aEucalyptus grandis x E. urophylla se destaca em plantios brasileiros devido às características que herdou de seus parentais, como qualidade da madeira para a produção de papel e celulose. O objetivo deste trabalho foi desenvolver um protocolo de organogênese indireta com explantes foliares e aperfeiçoar aspectos da transformação genética mediante co-cultura com Agrobacterium tumefaciens. Para estabelecer o protocolo de organogênese indireta, na fase de calogênese, testaram-se diferentes concentrações de ANA e, em seguida, de TDZ combinado com ANA ou com 2,4-D no meio de cultura JADS por 30 dias, seguido de subcultura em meio de regeneração, contendo 5,0 ?M de BAP e 0,5 ?M de ANA por mais 30 dias. Nesses meios, os explantes tiveram alta oxidação. A fim de diminuir a oxidação, diferentes meios de cultura foram comparados: WPM, MS, JADS e QL. Obteve-se a maior porcentagem de regeneração e menor taxa de oxidação após cultura em meio WPM seguido de transferência a meio de regeneração. Assim, testaram-se ANA e 2,4-D combinado com TDZ, e em seguida, TDZ e BAP combinado com ANA no meio de cultura WPM. O tratamento mais eficiente em termos de regeneração de gemas foi o meio de cultura WPM e a combinação de 0,25 ?M de TDZ e 0,1 ?M de ANA por 30 dias para a calogênese e, em seguida, 5,0 ?M de BAP e de 0,5?M de ANA por outros 30 dias. Este protocolo proporcionou uma regeneração de brotos de até 46%, com uma baixa oxidação dos tecidos. Observou-se que a idade das brotações utilizadas como fonte de explantes não tinha efeito sobre a organogênese e que pode-se utilizar explantes de 3, 4 ou 5 semanas na última subcultura. Para determinar as concentrações dos agentes seletivos que seriam utilizadas durante a transformação genética, testaram-se diferentes concentrações de canamicina, glufosinato de amônio e manose combinada com sacarose. Os resultados mostraram que se deve iniciar a seleção das plantas transformadas com o gene nptII em 12,5 mg L-1 de canamicina; para plantas transformadas com o gene bar em 0,5 mg L-1 de glufosinato de amônio; para plantas transformadas com o gene pmi em 22,5 g de sacarose e 7,5 g de manose. Experimento visando testar Augmentin® e cefotaxima na eliminação de Agrobacterium tumefaciens também foi realizado. Na presença de Augmentin, os explantes formaram calos brancos e não oxidados, enquanto que, na presença de cefotaxima, os calos oxidaram. Para diminuir a oxidação imediata dos explantes transformados com o gene bar, esses foram deixados um mês sem glufosinato de amônio após a co-cultura, enquanto que no controle os explantes ficaram em meio de cultura com o agente seletivo. Neste experimento, todos os explantes do controle oxidaram e necrosaram, não formando calos, enquanto que os explantes que foram mantidos um mês sem glufosinato de amônio formaram calos. No entanto não houve regeneração de gemas o que impediu avaliar a eficiência da transformação genética. Além da transformação de explantes foliares com o gene bar, realizou-se transformação com o gene nptII, a qual originou brotações resistentes a 50 mg L-1 de canamicina.
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Registro original: |
Embrapa Florestas (CNPF) |
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| Registros recuperados : 7 | |
| 3. |  | OLIVEIRA, C. de; BETTENCOURT, G.; QUOIRIN, M.; DEGENHARDT-GOLDBACH, J. Influência de combinações de TDZ, BAP e ANA na organogênese indireta de Eucalyptus grandis x E. Urophylla. In: CONGRESSO BRASILEIRO DE FLORICULTURA E PLANTAS ORNAMENTAIS, 19.; CONGRESSO BRASILEIRO DE CULTURA DE TECIDOS DE PLANTAS, 6., 2013, Recife. Anais dos trabalhos. Recife: UFRPE, 2013. 1 p. CD-ROM. Resumo.| Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
| Biblioteca(s): Embrapa Florestas. |
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| 4. | | OLIVEIRA, C. de; QUOIRIN, M. G. G.; DEGENHARDT-GOLDBACH, J. Influência do ácido naftaleno acético e do 2,4-diclorofenilacético na regeneração in vitro do clone 3336 de Eucalyptus grandis x E. urophylla. In: EVENTO DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA DA EMBRAPA FLORESTAS, 12., 2013, Colombo. Anais. Colombo: Embrapa Florestas, 2013. (Embrapa Florestas. Documentos, 253). Editores técnicos: Marcílio José Thomazini, Elenice Fritzsons, Patrícia Raquel Silva, Guilherme Schnell e Schuhli, Denise Jeton Cardoso, Luziane Franciscon. EVINCI. Resumos.| Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
| Biblioteca(s): Embrapa Florestas. |
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| 5. | | OLIVEIRA, C. de; DEGENHARDT-GOLDBACH, J.; BETTENCOURT, G. M. de F.; AMANO, E.; FRANCISCON, L.; QUOIRIN, M. Micropropagation of Eucalyptus grandis X E. urophylla AEC 224 clone. Journal of Forestry Research, v. 28, n. 1, p. 29-39, Jan. 2017.| Tipo: Artigo em Periódico Indexado | Circulação/Nível: B - 1 |
| Biblioteca(s): Embrapa Florestas. |
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| 6. | | OLIVEIRA, Y. de; ADAMUCHIO, L. G.; OLIVEIRA, C. de; DEGENHARDT-GOLDBACH, J.; GERHARDT, I.; BESPALHOK FILHO, J. C.; DIBAZ, R.; QUOIRIN, M. Indirect organogenesis from leaf explants of Eucalyptus benthamii x Eucalyptus dunnii and shoot multiplication. In: IUFRO TREE BIOTECHNOLOGY CONFERENCE, 2011, Arraial d'Ajuda. From genomes do integration and delivery: extended abstracts proceedings. [S.l.]: Embrapa: Veracel: IUFRO, 2011. 1 CD-ROM.| Tipo: Artigo em Anais de Congresso |
| Biblioteca(s): Embrapa Florestas. |
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| 7. | | TRAPE, M. Z.; OLIVEIRA, C. de; BARBOSA, N. L. N.; VALLE, J. F. C.; LORZA, R. F.; KAGEYAMA, P. Y.; SORRENTINO, M.; FERRETTI, A. R.; SANTOS, J. D. dos; BARROS, M. I. A. de. Plantio de espécies arbóreas nativas com finalidade econômica em área de reserva legal. In: CONGRESSO BRASILEIRO SOBRE SISTEMAS AGROFLORESTAIS, 1.; ENCONTRO SOBRE SISTEMAS AGROFLORESTAIS NOS PAÍSES DO MERCOSUL, 1., 1994, Porto Velho. Anais. Colombo: EMBRAPA-CNPF, 1994. v. 1, p. 375-390. (EMBRAPA-CNPF. Documentos, 27). Tema Central: Sistemas Agroflorestais no Desenvolvimento Sustentável. v.1 Trabalhos convidados. Editores Luciano J. Montoya e Moacir J.S. Medrado.| Biblioteca(s): Embrapa Florestas. |
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