02273nam a2200205 a 450000100080000000500110000800800410001910000200006024501080008026000850018852016330027365000260190665000200193265000160195265300270196865300080199565300210200370000210202470000220204510829532012-06-26 2004 bl uuuu u0uu1 u #d1 aVECHIATO, M. H. aAvaliação de métodos para detecção de Diaporthe phaseolorum var. meridionalis em sementes de soja. aSumma Phytopathologica, Botucatu, v. 30, n. 4, p. 464-469, Oct./Dec. 2004.c2004 aOs métodos de sanidade atualmente empregados na detecção de fungos do gênero Diaporthe em sementes de soja não são adequados, tendo em vista a variabilidade apresentada pelo complexo Diaporthe/Phomosis, pois para sua identificação são utilizadas as características morfológicas das colônias que se desenvolvem sobre as sementes. Este trabalho teve como objetivos comparar três métodos para detecção e identificação de Diaporthe phaseolorum var. meridionalis em sementes de soja e aferir a eficiência dos mesmos em testes de rotina em laboratórios de sementes. Foram utilizadas oito amostras de sementes comerciais e uma amostra de sementes da cultivar lASS isenta de Diaporthe e inoculada com Dph, utilizada como padrão, para comparar os métodos: a) papel de filtro modificado com 2,4D, b) plaqueamento em meio Czapeck e c) papel de filtro modificado com 2,4D e PCR. A avaliação foi feita baseando-se nas características morfológicas de Diaporthe spp. que se desenvolveram sobre as sementes. Para extração de DNA do micélio do patógeno, no método papel de filtro modificado com 2,4D, as sementes, após incubação, foram submetidas à lavagem em tampão de extração. Os DNAs foram purificados e utilizados como molde na reação de PCR com iniciadores específicos de 20 pb. O método de incubação das sementes em papel de filtro com 2,4D associado a técnica de PCR foi o mais eficiente para detecção e identificação de D. phaseolorum var. meridionalis. A sensibilidade deste método para detecção de Dph em sementes foi de uma semente infectada em uma amostra de 400 sementes de soja. aDiaporthe phaseolorum aCancro da Haste aGlycine Max aMétodos de detecção aPCR aSementes de soja1 aMARINGONI, A. C.1 aMARTINS, E. M. F.