03767nam a2200217 a 450000100080000000500110000800800410001910000150006024500860007526000160016130000100017750001020018752031220028965000120341165000220342365000120344565000240345765300220348165300260350365300200352916621582024-02-28 2008 bl uuuu m 00u1 u #d1 aLUZ, V. B. aPerfusão do dimetilsulfóxido em tecido ovariano caprino.h[electronic resource] a2008.c2008 a60 f. aDissertação (Mestrado em Ciências Veterinárias) - Universidade Estadual do Ceará, Fortaleza. aO objetivo deste trabalho foi determinar tempos e concentrações ideais para a perfusão do dimetilsulfóxido (DMSO) para criopreservação de tecido ovariano caprino. Para tanto o córtex ovariano foi dividido em 25 fragmentos e um fragmento aleatoriamente escolhido foi imediatamente fixado (controle); enquanto os fragmentos restantes foram expostos a 20°C ao DMSO nas concentrações de 1;0 M; 1;5 M e 2;0 M por 10; 20; 30 e 40 minutos. A partir dos melhores resultados da exposição foi realizada a congelação lenta e posteriormente avaliada a viabilidade folicular. Para a análise do efeito da concentração e do tempo de exposição sobre a morfologia e viabilidade de folículos pré-antrais (FOPA); foi utilizada ANOVA seguida de teste t. Os valores foram considerados significativos quando P < 0;05. Os resultados mostraram que a percentagem de folículos pré-antrais normais foi similar ao controle em todos os tratamentos; exceto quando o tecido ovariano foi exposto a 2;0 M por 30 e 40 minutos. Através da cromatografia líquida de alta eficiência foi observado que o tempo de exposição não exerceu influência nos níveis teciduais do DMSO. Entretanto; em geral maiores níveis teciduais de DMSO foram obtidos na concentração de 2;0 M. Após criopreservação o percentual de FOPA viáveis foi semelhante ao controle nos fragmentos exposto por 10 minutos a 1;0 M e 1;5 M de DMSO. Em conclusão; este trabalho demonstrou que a exposição do tecido ovariano caprino a 1;0 M ou 1;5 M de DMSO por 10 minutos foi eficiente; preservando a viabilidade dos FOPA após a congelação. Abstract - The aim of this study was to determine the optimal time and concentration of dimethyl sulfoxide (DMSO) perfusion for the cryopreservation of caprine ovarian tissue. For this, the caprine ovarian cortex was divided in 25 small fragments (3x3x1 mm), one fragment being randomly removed and fixed immediately (control). The remaining fragments were exposed to 1.0, 1.5 or 2.0 M DMSO at 20°C for 10, 20, 30 or 40 minutes. According to the best results obtained after exposure, cryopreservation by slow cooling was performed. Subsequently, follicular viability was evaluated. The effect of the cryoprotectant concentration and exposure time on the morphology and viability of the preantral follicles, was evaluated by using ANOVA and t test. The values were considered significant when P<0.05. The percentage of normal preantral follicles was similar to control values in all treatments, except when the ovarian tissue was exposed to 2.0M DMSO for 30 and 40 minutes. The HPLC method allowed us to observe that the exposure time did not exerts influence on the tissue levels of DMSO. Therefore, the highest perfusion of DMSO was observed at the concentration of 2.0 M. After cryopreservation, the percentages of viable follicles was similar to control when ovarian tissue was exposed to 1.0 or 1.5 M DMSO for 10 minutes. In conclusion, this study shows that exposure of caprine ovarian tissue to 1.0 M or 1.5 M DMSO for 10 minutes was efficient to preserve follicular viability after cryopreservation. aCaprino aCriopreservação aOvário aReprodução animal aDimetilsulfóxido aFolículo pré-antral aTecido ovariano