02617naa a2200289 a 450000100080000000500110000800800410001902200140006010000210007424501270009526000090022252017560023165000450198765000160203265000220204865300140207065300270208465300120211165300110212365300100213465300240214465300140216870000260218270000210220870000200222977300780224916534112005-12-13       2004    bl uuuu     u00u1 u    #d  a0100-54051 aVELAME, K. V. C.  aProdução de anti-soro contra o vírus associado com a murcha do abacaxizeiro (Pineapple mealybug wilt-associated virus).  c2004  aEm 1910 foi detectada em abacaxi, no Havaí, uma doença anos depois denominada de murcha do abacaxi e que é causada pelo vírus associado com a murcha do abacaxi (Pineapple mealybug wilt-associated virus, PMWaV). Hoje ela está presente nas principais regiões produtoras do mundo. Este trabalho visou desenvolver um anti-soro para a detecção do PMWaV. Para isso, realizaram-se extrações de proteína total de plantas com e sem sintomas de murcha. Ambos os extratos foram aplicados em gel de poliacrilamida (4% e 12%, p/v) e a eletroforese realizada em condições desnaturantes. O gel foi corado com Coomassie brilliant blue R-250. Utilizando-se um marcador de peso molecular (66 a 14,2 kDa) identificou-se banda de 24 kDa, presente apenas no perfil eletroforético das proteínas extraídas de folhas com sintomas de murcha. Esta banda foi recortada dos géis, homogeneizada por maceração em almofariz, emulsificada com adjuvante completo de Freund e utilizada para imunização de coelho. Concluído o programa de imunização, 42 dias após o início das injeções, o coelho foi anestesiado e sacrificado para a coleta total do seu sangue. O anti-soro foi avaliado em Dot-ELISA indireto, tendo-se empregado, o anti-soro contra o PMWaV e a IgG cabra-anti-coelho conjugado diluídos a 1:1.000. Como controle positivo utilizaram-se amostras foliares de abacaxizeiro com sintomas de murcha e como controle negativo amostras provenientes de abacaxizeiros produzidos a partir de sementes botânicas e mantidos em casa de vegetação. O anti-soro permitiu distinguir plantas sadias das infectadas e começou a ser utilizado para indexar matrizes e acessos do Banco Ativo de Germoplasma de Abacaxi da Embrapa Mandioca e Fruticultura para o PMWaV.  aPineapple mealybug wilt-associated virus  aAgricultura  aDoença de Planta  aDot-ELISA  aMurcha do abacaxizeiro  aPlantas  aPMWa V  aPMWaV  aProteína capsidial  aSorologia1 aMEISSNER FILHO, P. E.1 aSANTOS, L. de S.1 aPORTUGAL, A. M.  tSumma Phytopathologica, Botucatugv. 30, n. 3, p.346-349, jul./set. 2004.