01718naa a2200253 a 450000100080000000500110000800800410001902200140006010000240007424501450009826000090024352010040025265000140125665000140127065000110128465300140129565300080130970000180131770000210133570000150135670000180137170000190138977300560140816346441997-11-13       1997    bl uuuu     u00u1 u    #d  a0100-41581 aTARGON, M. L. P. N.  agene da capa proteica de um isolado brasileiro do "Citrus tristeza virus"bclonagem, expressao em E. coli e producao de antissoro policlonal  c1997  aO RNA dupla fita (dsRNA) do "citrus tristeza virus" (CTV), correspondendo a forma repicativa do RNA simples fita (ssRNA), foi isolado de 1g de tecido de casca liofilizado de laranja Pera Ipigua (Citrus sinensis Osb.) e usado como molde para a sintese da primeira fita de cDNA pela MuMLV transcriptase reversa. O gene da capa proteica foi amplificado por PCR usando primers especificos do virus. O produto da amplificacao foi clonado no vetor de expressao pMAL-c2 e celulas de E. coli DH5 foram transformadas. A expressao da proteina de fusao (proteina do capsideo do CTV mais o fragmento da proteina de ligacao da maltose de E. coli) foi induzida com IPTG. A proteina de fusao foi purificada por cromatografia em coluna de afinidade e usada como antigeno na producao de antissoro policlonal em coelhos. O rendimento medio de proteina foi de 25ug/ml de cultura. O anticorpo produzido reagiu especificamente contra a proteina do capsideo do CTV e nao apresentou reacao cruzada com proteinas da planta.  aAnticorpo  aAntissoro  aVírus  aCitrus sp  aCTV1 aNIKOLAEVA, O.1 aMANJUNATH, K. L.1 aLEE, R. F.1 aMULLER, G. W.1 aMACHADO, M. A.  tFitopatologia Brasileiragv.22, n.1, p.99-102, 1997