02604naa a2200301 a 450000100080000000500110000800800410001902200140006010000220007424500670009626000090016352018420017265000110201465000150202565000200204065000200206065000230208065300140210365300080211765300120212565300150213770000190215270000190217170000170219070000170220770000210222477300570224516346351997-11-12 1997 bl uuuu u00u1 u #d a0100-41581 aLIMA, J. E. O. de aDiagnose da clorose variegada dos citros por microscopia otica c1997 aA Clorose Variegada dos Citros (CVC ou Amarelinho) e causada pela colonizacao dos vasos do xilema pela bacteria Xylella fastidiosa. A facil obtencao de extratos do xilema utilizando-se uma seringa ermitiu um rapido e simples diagnostico da doenca pelo microscopio otico. Pedacos de peciolos foram encaixados na extremidade de seringas e um liquido forcado por leve pressao no embolo atraves do xilema, resultando em gotas de extrato adequadas para a observacao ao microscopio otico a X400. As bacterias Gram-negativas, cuja melhor coloracao nas gotas extraidas do xilema obteve-se com azul de metileno, aparecem dispersas ou em aglomerados com forma e dimensoes caracteristicas do patogeno, apresentando coloracao azul clara, mais escura nas extremidades. A agua destilada esterilizada mostrou-se o melhor liquido extrator quando comparada com etanol, PBS, hidroxido de potassio e oleo mineral. As melhores gotas para observacao foram a terceira ou quarta retiradas sucessivamente de cada amostra. A desidratacao das amostras a temperatura ambiente por sete dias influenciou negativamente na extracao e observacao do conteudo do xilema. O armazenamento das amostras por 60 dias em geladeira, assim como o seu tratamento a 52oC por 30 minutos ou tres horas, naointerferiu na obtencao dos extratos ou na observacao das bacterias ao microscopio, mostrando que este teste, como os demais disponiveis, naodistingue entre bacterias vivas ou mortas. A correlacao entre o numero de bacterias na amostra determinado ao microscopio e sua leitura de densidade otica no teste ELISA foi significativa. O microscopio otico, no entanto, foi ligeiramente superior na deteccao de bacterias em folhas de ramos com CVC. Extratos de outras plantas pelo metodo da seringa foram obtidos mas apenas se detectou bacterias do xilema em cafeeiros (Coffea arabia). aCitrus aAmarelinho aCitrus Sinensis aCoffea ArĂ¡bica aXylella Fastidiosa aBacterium aCVC aDisease aManagement1 aMIRANDA, V. S.1 aROBERTO, S. R.1 aCOUTINHO, A.1 aPALMA, R. R.1 aPIZZOLITO, A. C. tFitopatologia Brasileiragv.22, n.3, p.370-374, 1997