01873naa a2200229 a 450000100080000000500110000800800410001910000230006024500700008326000090015352012790016265000110144165300110145265300180146365300150148165300170149665300140151370000210152770000240154870000180157277300530159016344011996-08-13       1995    bl uuuu     u00u1 u    #d1 aOLIVEIRA, de R. P.  aIsolamento e cultivo de protoplastos de porta-enxertos de citros.  c1995  aRealisou-se o isolamento e cultivo de protoplastos de porta-enxertos de citros das variedades limoeiro cravo e tangerina Cleopatra. Utilizou-se solucao enzimatica para a digestao da parede celular de celulas emsuspensao ( 7 a 10 subcultivos em meio de cultura MT) e procedeu-se apurificacao criteriosa. O plaqueamento dos protoplastos foi realizado em meio de cultivo KM8p e na molaridade de 0.6 m, sob condicoes de escuro a 28+ou-1C, apos ajuste para a densidade de 2x10 ppts/ml. A reducao da pressao osmotica do meio de cultivo foi realizada a cada 10 dias na seguinte proporcao de meio de cultura KM8p 0.6 M e KM8 (2:1, 1:1, 1:2,0:3). Com relacao aos resultados, obteve-se em media o isolamento de0.7 x 10 ppts / ml de suspencoes celulares de tangerina Cleopatra e 0.5 x 10 ppts / ml de suspensoes de limoeiro cravo, com uma porcentagem de viabilidade de 86 a 92% para a variedade cleopatra e de 73 a 80% para o limoeiro Cravo. As divisoes celulares comecaram a ocorrer por volta do 8 dia apos o plaqueamento, sendo obtida uma eficiencia inicial de plaqueamento de 9% para a variedade Cleopatra e de 5% para o limoeiro Cravo. Aos 50 dias de cultivo, as colonias foram transferidas para meio semi-solido MT, onde apresentaram ritmo acelerado de crescimento formando calos.  aCitrus  aCitros  aPorta-enxerto  aProtoplast  aProtoplastos  aRootstock1 aMENDES, B. M. J.1 aULTRA VAZ, F. B. D.1 aTULMANN NETO.  tSci. agric., Piracicabagv.52, n.2, p.244, 1995.