02635nam a2200373 a 450000100080000000500110000800800410001910000270006024501990008726000550028630000100034149000230035150000730037452014820044765000130192965000180194265000220196065000130198265000140199565000130200965000140202265000170203665000150205365300310206865300190209965300170211865300160213565300080215165300360215965300140219565300080220965300290221765300150224616225571997-08-20 1997 bl uuuu m 00u1 u #d1 aTEIXEIRA, K. R. dos S. aAcetobacter diazotrophicus, endofito diazotrofico associado a cana de acucarbpresenca de plasmideos e sequenciamento do gene nifA, responsavel pela regulacao da fixacao biologica de nitrogenio. aRio de Janeiro: Fundacao Osvaldo Cruz, Abrilc1997 a152p. aTese de Doutorado. aTese de Doutorado. Orientada por: Ricardo Galler e Jose Ivo Baldani. aacetobacter diazotrophicus, bacteria endofitica fixadora de nitrogenio, isolada a partir de cana-de-acucar tem sido considerada a principal responsavel pela fixacao biologica de N2 associada a esta cultura. Varios aspectos fisio-ecologicos deste diazotrofo tem sido estudado, entretanto pouco se conhece sobre o seu conteudo e organizacao genetica. A presenca de plasmideo de tamanho entre 2,5 e 163 kb foi observada em isolados do Brasil, Australia e Uruguai. Sondas dos plasmideos pAD170 e pAD24 isolados a partir da estirpe PR2 foram utilizadas para avaliar a diversidade genetica das estirpes. Foi observada a conservacao do plasmideo pDA170 ou parte dele, uma vez que na estirpe PAL3 a hibridizacao ocorreu em plasmideo de 97 kb. A sonda do pAD24 so hibridizou complasmideos das estirpes PRC1, PRC4, URU E LMGL733. Hibridizacao de sondas dos genes nifH e nifA contra plasmideos e DNA de A.diazotrophicus revelou a presenca de regioes homologas apenas ao DNA total, sugerindo que estes genes estao localizados no cromossoma. Um banco genomico de A.diazotrophicus PAL5 foi construido e, o plasmideo recombinante pAD101 foi isolado atraves de complementacao de mutante ntrCnifA- de Azotobacter vinelandii. O sequenciamento de subclones do pAD101 revelou a presenca dos genes nifK, nifA e nifB no inserto de DNA de A.DIAZOTROPHICUS. A analise dos genes nifA e parte do nifB de A.diazotrophicus e apresentada e a organizacao em relacao ao operon nifHDK e proposta e discutida. agenetics ahybridization amolecular biology aplasmids aBactéria aBiologia aGenética aHibridação aPlasmídeo aAcetobacter diazotrophicus aCana-de-acucar aDiazotrifica aDiazotrophy aFBN aFixacao biologica de nitrogenio aMolecular aNBF aNitrogen fixing bacteria aSugar cane