01976nam a2200289 a 450000100080000000500110000800800410001910000210006024500870008126000240016830000090019250000190020152012700022065000120149065000140150265000110151665000120152765000220153965000130156165000230157465000100159765000130160765000220162065000160164265300140165865300140167215600232000-06-24 1979 bl uuuu m 00u1 u #d1 aARAUJO, E. F. de aCaracterizacao da sintetase da L- glutamina de folhas de Manihot esculenta Crantz. aBrasilia: UnBc1979 a74p. aTese Mestrado. aO estudo de GS de Manihot esculenta Crantz em cultura hidroponica com diferentes niveis de nitrogenio na forma de NH4 e/ou NO-3, nao mostrou variacoes significativas da sua atividade especifica. A atividade especifica de GDH variou muito pouco frente aos diferentes niveis de nitrogenio. A alta atividade especifica de GS e contrastada com a baixa atividade de GDH. A extracao com Tween 80 1% aumentou a atividade de GS de aproximadamente dez vezes, enquanto a atividade especifica aumentou de tres vezes. A sintetase de L- glutamina foi parcialmente purificada apresentando somente uma banda contaminante de proteina na eletroforese em gel de poliacrilamida a 5%, apos cromatografia em DEAE-celulose. Na reacao catalizada pela GS a liberacao de 1 umol de Pi foi acompanhada pela formacao de aproximadamente 1 umol de hidroxamato. Os valores de Km obtidos para L-glutamato e ATP foram respectivamente 9,1 e 1,85 mM. Os Kms para amonia e hidroxilamina, determinados por interpolacao direta na curva de saturacao (V X S) foram da ordem de o,6 mM. Os dados da cinetica com amonia e hidroxilamina nao apresentaram uma relacao linear no grafico de Lineweaver-Burk e o calculo do coeficiente de Hill (n=1,80) indicou que ambos sao ativadores alostericos de GS de Manihot. acassava aglutamine aleaves aligases amolecular biology anitrogen aBiologia Molecular aFolha aMandioca aManihot Esculenta aNitrogĂȘnio aGlutamina aSintetase