02752naa a2200217 a 450000100080000000500110000800800410001910000190006024500940007926000090017330000140018250000450019652020380024165000170227970000140229670000210231070000230233170000170235470000210237177301420239214705812012-02-16       2007    bl uuuu     u00u1 u    #d1 aVESPERO, E. C.  aEpidemiologia molecular de isolados clínicos de Klebsiella pneumoniae produtora de esbl.  c2007  c1 CD-ROM.  aNome correto do quinto autor HUNGRIA, M.  aVários novos mecanismos de resistência aos antimicrobianos, como KPC e Metalobetalactamases tem sido identificado em amostras clínicas de K.pneumoniae. Porém, a produção de ESBL continua sendo o mais comum e importante mecanismo de resistência aos ß-lactâmicos nesta bactéria. O objetivo deste trabalho foi verificar a epidemiologia molecular de K. pneumoniae produtoras de ESBL isoladas em 141 amostras de pacientes do Hospital Universitário da Universidade Estadual de Londrina, no período de cinco anos (2000-2004). Inicialmente, foram realizados PCR com primers específicos para os genes blatem, blashv e blactx-m. Os produtos de PCR foram submetidos a técnica de RFLP com diversas enzimas de restrição e a partir dos diferentes perfis obtidos, os produtos de PCR foram purificados e ligados ao Vetor TOPO TA Expression (Invitrogem). Transformado em células ultra-competentes de E.coli TOP 10, por eletroporação, com o produto da reação de ligação. As células transformadas foram selecionadas em placas LB contendo ampicilina, X-gal e IPTG. Os DNAs plasmidiais foram extraídos através de lise alcalina, seguido de PCR e sequenciamento. Das 142 amostras analisadas, várias amplificaram para mais de um gene, sendo que 133 amostras amplificaram para o gene ctx-m, 5 amostras para o gene tem e 135 para shv. Diversas combinações de enzimas foram obtidos: SHV-5 +TEM-1=1, SHV-1+ TEM=2, SHV-5+CTX-M-2=37, SHV-11+CTX-M-2=23, SHV-11=2, SHV-2+CTX-M-2=22, SHV-1+CTX-M-2=44, SHV-5=1, SHV-11 +TEM=2, CTX-M-2=5, CTX-M-54+SHV-1=1, CTX-M-54=1. A enzima CTX-M-2 foi a mais frequente dentro do grupo das CTX-M,  encontrada em 131 isolados clínicos. Este dado confirma os dados de outros trabalhos em diferentes regiões da América Latina, que esta enzima está disseminada nos isolados de K.pneumoniae e também entre outras enterobactérias produtoras de ESBL. O conhecimento da epidemiologia molecular desta bactéria é importante para a melhor conduta na utilização de antimicrobianos no ambiente hospitalar.  aepidemiology1 aMENNA, P.1 aBARCELLOS, F. G.1 aPERUGINI, M. R. E.1 aCUNHA, M. H.1 aSARIDAKIS, H. O.  tIn: CONGRESSO BRASILEIRO DE MICROBIOLOGIA, 24., 2007, Brasília, DF. Anais... Brasília, DF: Sociedade Brasileira de Microbiologia, 2007.