03230naa a2200181 a 450000100080000000500110000800800410001910000170006024501440007726000090022130000110023052026400024170000140288170000180289570000210291370000160293477300980295014621142008-10-30       2008    bl uuuu     u00u1 u    #d1 aBINDE, D. R.  aAnálise filogenética com base no gene ribossomal 16S, de 54 estirpes elite de rizóbios utilizadas em inoculantes comerciais brasileiras.  c2008  ap. 13.  aEntre as bactérias fixadoras de nitrogênio (N2), os rizóbios, em simbiose com leguminosas, estão entre as mais importantes para a agricultura, contudo, a seleção, identificação e manutenção de estirpes elite simbiontes de cada hospedeira em coleções de culturas, são etapas críticas para a maximização do processo de fixação biológica do N2. Um problema atual nas coleções de culturas reside nas profundas alterações que ocorreram na taxonomia dos procariotos, incluindo as bactérias fixadoras de N2, como resultado do uso de métodos moleculares, com ênfase na análise dos genes ribossomais, no caso de bactérias, o 16S rRNA. Neste estudo, foram determinadas as seqüências de nucleotídeos do gene 16S rRNA. De 54 estirpes elite da "Coleção de Culturas de Rizóbios (SEMIA)" da FEPAGRO, que são recomendadas oficialmente, no Brasil, para a produção de inoculantes para 47 leguminosas. O objetivo principal do trabalho foi o de obter uma melhor compreensão das relações filogenéticas entre essas 54 estirpes de rizóbios. Para tanto, foi feita a caracterização morfológica-fisiológica das estirpes, através da determinação da cor, mucosidade, diâmetro, transparência, bordas e elevação das colônias, bem como da reação ácida ou alcalina e determinação da velocidade de crescimento em meio de cultura contendo manitol como fonte de carbono. Para realização do seqüenciamento do gene RNAr 16S das estirpes, foi feita a extração do DNA total e posterior amplificação do gene, com primers apropriados. Com a obtenção completa do gene RNAr 16S, realizou-se a construção de árvore filogenética, gerada pelo programa MEGA versão 3.1, com o alinhamento múltiplo das seqüências obtidas, gerado pelo programa CLUSTAL X, versão 1.83. A árvore filogenética obtida possibilitou a análise da filogenia, a determinação da posição taxonômica e a relação filogenética entre as estirpes. Seis grupos filogenéticos principais foram definidos entre as bactérias estudadas: Bradyrhizobium, Rhizobium, Sinorhizobium (=Ensifer), Mesorhizobium, Methylobacterium e Burkholderia. Das 54 estirpes, a análise do gene 16S rRNA resultou na reclassificação de 18 delas, em relação à classificação prévia, com base nas  propriedades morfo-fisiológicas in vitro e de especificidade hospedeira. Houve fortes  indicações, ainda, de 12 novas espécies de rizóbios. Recomendação proposta: a grande diversidade observada neste estudo salienta que os trópicos são um reservatório importante de genes de fixação de N2, que ainda precisa ser melhor estudado e explorado.1 aMENNA, P.1 aBANGEL, E. V.1 aBARCELLOS, F. G.1 aHUNGRIA, M.  tIn: RELARE, 14., 2008, Bonito. Programa e resumos. [S.l.]: Embrapa Agropecuária Oeste, 2008.