02909nam a2200289 a 450000100080000000500110000800800410001910000220006024501100008226001560019230000210034849000460036952019620041565000240237765000160240165000110241765000100242865000150243865000300245365300090248365300270249270000220251970000230254170000180256470000220258270000150260413268932009-04-30       2006    bl uuuu     u0uu1 u    #d1 aARAÚJO, F. R. de  aELISA com MSP5 recombinante truncada para detecção de anticorpos contra Anaplasma marginale em bovinos.  aIn: SÉRIES Embrapa: [coletânea de publicações seriadas da Embrapa Gado de Corte - 2006 - 2007 -2008]. Campo Grande, MS: Embrapa Gado de Cortec2009  a27 p.c1 CD-ROM.  a(Embrapa Gado de Corte. Documentos, 163).  aOs objetivos buscados pelos autores neste estudo foram produzir e solubilizar a proteína MSP5 recombinante truncada de Anaplasma marginale e avaliar seu desempenho em um ensaio de imunoadsorção enzimática indireto para detecção de anticorpos contra a riquétsia. O gene msp5, exceto a região N-terminal hidrofóbica, foi amplificado por reação em cadeia da polimerase, clonado em plasmídeo pTrcHis-TOPO e expresso em Escherichia coli. A solubilização da proteína recombinante foi avaliada em diferentes pHs e concentrações de uréia. A sensibilidade e a especificidade do ensaio foram avaliados testando-se 66 soros de animais infectados experimentalmente com A. marginale e 96 soros negativos, com o estado de infecção desses animais confirmado por reação em cadeia da polimerase. Um total de 1.666 amostras de soros bovinos, provenientes do Brasil - Rio Grande do Sul (73), Mato Grosso do Sul (91), Pernambuco (86), Bahia (314) e Minas Gerais (267), assim como do Uruguai (32) e Costa Rica (803) foram testadas nos ELISAs com MSP5 truncada e com MSP1a recombinantes, e a concordância entre os dois testes foi avaliada. O ELISA indireto com MSP5 truncada foi capaz de detectar animais infectados com 96,97% de sensibilidade e 100% de especificidade. Nos animais infectados experimentalmente, o ELISA detectou anticorpos do 12o dia após a inoculação (DPI) até o último dia de observação (37o DPI). Os ELISAs para MSP5 e MSP1a apresentaram concordância de 95,67%, com índice kappa de 0,81. Os resultados discordantes apresentaram uma diferença significativa (P &lt 0,001). Anticorpos contra A. marginale foram detectados em animais de todas asregiões estudadas. O ELISA com MSP5 recombinante truncada apresentou bom desempenho na detecção de anticorpos contra A. marginale, com alta sensibilidade e especificidade, representando uma importante ferramenta para o diagnóstico da anaplasmose bovina em estudos epidemiológicos.  aAnaplasma Marginale  aAnaplasmose  aBovino  aElisa  aImunologia  aTécnica Imunoenzimática  aMSP5  aProteína recombinante1 aMELO, E. S. de P.1 aRAMOS, C. A. do N.1 aSOARES, C. O.1 aROSINHA, G. M. S.1 aELISEI, C.