02830naa a2200349 a 450000100080000000500110000800800410001902400570006010000190011724501100013626000090024652018460025565000170210165000110211865000150212965000250214465000190216965000240218865000160221265000110222865000100223965000210224965000150227065300090228570000180229470000200231270000180233270000220235070000150237270000190238777300740240613263592023-06-20       2007    bl uuuu     u00u1 u    #d7 ahttps://doi.org/10.1590/S0100-736X20070007000082DOI1 aMELO, E. S. P.  aELISA com MSP5 recombinante truncada para detecção de anticorpos contra Anaplasma marginale em bovinos.  c2007  aOs objetivos deste estudo foram produzir e solubilizar a proteína MSP5 recombinante truncada de Anaplasma marginale, e avaliar seu desempenho em um ensaio de imunoadsorção enzimática indireto (ELISA) para detecção de anticorpos contra a riquétsia. O gene msp5, exceto a região N-terminal hidrofóbica, foi amplificado por PCR, clonado em plasmídeo pTrcHis-TOPO e expresso em Escherichia coli. A solubilização da proteína recombinante foi avaliada em diferentes pHs e concentrações de uréia. A sensibilidade e a especificidade do ensaio foram avaliados testando-se 66 soros de animais infectados experimentalmente com A. marginale e 96 soros negativos, com o estado de infecção destes animais confirmado por PCR. Um total de 1.666 amostras de soros bovino, provenientes do Brasil - Rio Grande do Sul (73), Mato Grosso do Sul (91), Pernambuco (86), Bahia (314) e Minas Gerais (267)-, Uruguai (32) e Costa Rica (803) foram testadas nos ELISAs com MSP5 truncada e com MSP1a recombinantes e a concordância entre os dois testes foi avaliada. O ELISA indireto com MSP5 truncada foi capaz de detectar animais infectados com 96,97% de sensibilidade e 100% de especificidade. Nos animais infectados experimentalmente, o ELISA detectou anticorpos do 12º até o último dia de observação (37º dia). Os ELISAs para MSP5 e MSP1a apresentaram concordância de 95,67%, com índice kappa de 0,81. Os resultados discordantes apresentaram uma diferença significativa (p &lt0,001). Anticorpos contra A. marginale foram detectados em animais de todas as regiões estudadas. O ELISA com MSP5 recombinante truncada apresentou bom desempenho na detecção de anticorpos contra A. marginale, com alta sensibilidade e especificidade, representando uma importante ferramenta para o diagnóstico da anaplasmose bovina em estudos epidemiológicos.  aAnaplasmosis  aCattle  aImmunology  aRecombinant proteins  aSolubilization  aAnaplasma Marginale  aAnaplasmose  aBovino  aElisa  aEscherichia Coli  aImunologia  aMSP51 aARAUJO, F. R.1 aRAMOS, C. A. N.1 aSOARES, C. O.1 aROSINHA, G. M. S.1 aELISEI, C.1 aMADRUGA, C. R.  tPesquisa Veterinária Brasileiragv. 27, n. 7, p. 301-306, jul. 2007.