02932nam a2200205 a 450000100080000000500110000800800410001910000200006024501500008026000160023030000110024650001870025752021760044465000130262065000150263365000220264865300240267065300140269465300180270811838712008-02-11       2006    bl uuuu  m   00u1 u    #d1 aABREU, E. F. M.  aClonagem e estudo da expressão do gene da mio-Inositol 3-Fosfato Sintase (MIPS) em maracujazeiro (Passiflora edulis Sims f. flavicarpa Degener).  a2006.c2006  a105 f.  aDissertação (Mestrado em Botânica) - Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Botânica, Brasília. Orientador: Francisco José Lima Aragão.  aA mio-inositol-lL-fosfato sintase (MIPS) é a enzima responsável pela conversão de D-glucose 6-fosfato a l-L-mio-inositol-l-fosfato, primeiro e limitante passo na via de síntese de todos os compostos derivados do inositol. Os inositol-fosfolipídios, assim como outros compostos derivados do inositol, têm um papel fundamental no tráfico de membrana e rotas de sinalização, estocagem e transporte de auxinas, biossíntese de ácido fitico e parede celular, e produção de moléculas relacionadas ao estresse. No presente trabalho, nós caracterizamos um cDNA do gene MIPS de sementes de Passiflora edulis f. flavicarpa (PeMIPSl) e investigamos a sua expressão espacial, bem como mudanças na transcrição em plantas submetidas ao estresse causado pelo frio e calor Para estas análises, uma seqüência do cDNA do gene MIPS foi isolada por PCR (5'e 3'RACE) e os níveis dos transcritos foram analisados usando RT-PCR semiquantitativo durante o desenvolvimento da semente, óvulo, grão-de-pólen, folha, caule, pétala, glândula foliar e em resposta ao estresse. A seqüência completa do cDNA do gene PeMIPS foi isolada, donada e caracterizada. Adicionalmente, o número de cópias do gene PeMIPS donado foi determinado por análise de Southem blot no genoma de Passiflora edulis, Passiflora eichleriana, Passiflora caerulea, Passiflora nUida e Passiflora coccinea. Esta análise indicou que o DNA genômico pode conter diversas seqüências de outros genes MIPS, mas uma única cópia do gene PeMIPS donado foi encontrado no genoma de P. edulis, P. eichleriana, P. caerulea, P. nUida e P. coccinea. A análise da expressão por RT-PCR revelou a presença de transcritos de PeMIPS em óvulos, grãos-de-pólen, folhas e durante os estágios do desenvolvimento da semente, com um pico nove dias após a polinização. Verificou-se ainda, que o gene PeMIPS é diferencialmente regulado sob condições de estresse causado pelo frio e calor em resposta à presença ou ausência de luz. Portanto, o presente trabalho sugere que o PeMIPS tem um importante papel no estabelecimento de programas de desenvolvimento e na resposta das plantas à mudanças ambientais.  aClonagem  aIsolamento  aPassiflora Edulis  aExpressão temporal  aGene MIPS  aMaracujazeiro