03427nam a2200253 a 450000100080000000500110000800800410001910000230006024501300008326000160021330000100022950001700023952025790040965000190298865000130300765000220302065000150304265000220305765000090307965300100308865300120309865300400311065300230315021599042023-12-18       2022    bl uuuu  m   00u1 u    #d1 aSILVA, R. C. S. da  aDiversidade genética de rizóbios de cunhã (Clitoria ternatea L.) em solos do Semiárido brasileiro.h[electronic resource]  a2022.c2022  a39 f.  aDissertação (Mestrado em Biociências) - Universidade Federal do Vale do São Francisco, Petrolina. Orientada por Paulo Ivan Fernandes Júnior, Embrapa Semiárido.  aA Clitoria ternatea oferece uma ampla diversidade de bactérias quando utilizada em diferentes tipos de solos da Caatinga, sendo uma excelente espécie para capturar rizóbios com eficiência. Dessa maneira, este trabalho teve por objetivo avaliar a diversidade de rizóbios nodulantes da Clitoria ternatea em diferentes solos da Caatinga, visando selecionar isolados eficientes para a promoção do crescimento vegetal. Os solos foram coletados em quatro localidades diferentes: Barbalha, CE, Petrolina, PE, Santa Maria da Boa Vista, PE e Araripina, PE. Em todos esses locais foram coletados tanto a rizosfera como o bulk soil. O experimento foi conduzido em casa de vegetação na Embrapa Semiárido em Petrolina, PE, utilizando as sementes da cunhã como planta-isca. O delineamento experimental foi feito ao acaso sendo utilizados vasos de 500ml, com oito tratamentos, cada um com três repetições. As plantas foram retiradas 60 dias após o plantio e os nódulos foram destacados das raízes, desinfestados e esmagados com pinça esterilizada em YMA contendo azul bromotimol e purificadas sucessivamente no mesmo meio para a obtenção de uma única colônia de bactéria. Após o processo de purificação, foi realizado a extração de DNA pelo kit brasílica para a amplificação simultânea dos genes simbióticos nifH e nodC em uma reação de PCR. Os isolados positivos para ambos os genes foram avaliados quanto à variabilidade genética pela análise dos perfis moleculares gerados por Box-PCR por meio da geração de um dendrograma de similaridade. Dentre os 120 isolados, 15 amplificaram apenas o gene nifH (12,5%) e 84 (70%) amplificaram os genes nifH+nodC simultaneamente. Os 84 isolados selecionados a partir da amplificação do gene nifH+nodC foram submetidos a técnica de Box-PCR para avaliar isolados idênticos. Os resultados obtidos por meio de um dendograma de similaridade pela técnica do Box-PCR demonstraram que só cinco grupos foram formados por isolados iguais, quatro com dois isolados e um grupo com três isolados. Os 78 isolados que foram identificados como diferentes no Box-PCR, na análise do ARDRA foram identificados como pertencentes aos gêneros Bradyrhizobium yuanmingense, Bradyrhizobium elkanii e Paraburkhoderia diazotrophica. Os isolados demonstraram uma elevada diversidade genética de rizóbios nodulantes da cunhã nos diferentes solos estudados neste trabalho tanto pela análise molecular Box-PCR e quanto pela técnica do ARDRA, bactérias analisadas se agruparam com estirpes de Bradyrhizobium e Paraburlkoderia.  aBradyrhizobium  aCaatinga  aClitoria Ternatea  aLeguminosa  aPlanta Forrageira  aSolo  aARDRA  aBox-PCR  aFixação biológica de nitrogênio  aRizóbio de Cunhã