02618nam a2200289 a 450000100080000000500110000800800410001910000200006024501250008026001450020552016780035065000110202865000130203965000210205265000150207365300270208865300100211565300240212570000200214970000220216970000220219170000220221370000200223570000190225570000250227470000290229921583552023-11-14       2023    bl uuuu     u01u1 u    #d1 aSOUSA, G. P. de  aModelagem e produção de espidroína sintética de seda de aranha para aplicações biomédicas.h[electronic resource]  aIn: ENCONTRO DE PESQUISA E INOVAÇÃO DA EMBRAPA AGROENERGIA, 7., 2023, Brasília, DF. Anais... Brasília, DF : Embrapa, 2023. p. 153.c2023  aSedas de aranhas são biopolímeros com extraordinárias características físico‑químicas. Elas podem ser processadas e utilizadas em diversos biomateriais inovadores como partículas, além da forma natural de fibras. Entretanto, por causa da limitação da obtenção desse material in natura, é necessário o desenvolvimento de sistemas de produção heteróloga de proteínas de seda de aranha (espidroínas). Neste trabalho, buscou‑se, por meio da biologia sintética, a produção de uma espidroína em Eschericha coli BL21(DE3). A espidroína sintética foi baseada na sequência da proteína MaSp2 da aranha do Cerrado brasileiro Parawixia bistriata, aqui denominada Engenheirada 1 (Eng1). Para isso, a espidroína Eng1 foi sintetizada no plasmídeo pET24a, contendo um peptídeo‑sinal de secreção de uma β‑xilosidase e mais oito repetições da região de interesse da MaSp2, além de regiões bioativas para endereçamento celular. As bactérias foram transformadas, e as proteínas foram produzidas por autoindução em frasco Erlenmeyer de 2 L. Logo após, as células foram precipitadas por centrifugação, e o sobrenadante foi concentrado por ultrafiltração para posterior purificação das espidroínas por cromatografia de afinidade. A produção da Eng1, com 33,54 kDa, foi confirmada por SDS‑PAGE corado com nitrato de prata e Western blot. A partir deste trabalho, foi possível desenvolver um sistema heterólogo para a produção de espidroínas sintéticas de sedas de aranhas. A vantagem deste sistema está na capacidade do peptídeo‑sinal de secretar a espidroína sintética para o meio de cultura.  aAranha  aBiologia  aEscherichia Coli  aPlasmídeo  aEspidroína sintética  aMaSp2  aParawixia bistriata1 aSOUSA, G. P. de1 aLACERDA, V. A. M.1 aROSINHA, G. M. S.1 aRECH FILHO, E. L.1 aSOUTO, B. de M.1 aQUIRINO, B. F.1 aALMEIDA, J. R. M. de1 aBITTENCOURT, D. M. de C.