02686naa a2200397 a 450000100080000000500110000800800410001902400510006010000220011124500890013326000090022230000100023152014690024165000310171065000100174165000150175165000100176665000140177665300400179065300240183065300290185465300300188365300320191365300110194565300310195665300350198765300430202270000170206570000170208270000210209970000170212070000190213770000240215670000260218077300820220621508672023-03-24       2023    bl uuuu     u00u1 u    #d7 ahttps://doi.org/10.1590/S1984-296120230052DOI1 aNICIURA, S. C. M.  aIn vitro culture of parasitic stages of Haemonchus contortus.h[electronic resource]  c2023  a12 p.  aHaemonchus contortus provoca grandes prejuízos à ovinocultura. Visando reduzir a utilização de ovinos hospedeiros e produzir estágios parasitários em larga escala, um protocolo para o cultivo in vitro por 42 dias de larvas de terceiro estádio de H. contortus foi realizado em meio Eagle, modificado por Dulbecco (DMEM). No cultivo sem células, as larvas foram mantidas a 39,6°C e incubadas em DMEM ácido (pH 6,1) por 3 ou 6 dias com 4?-ácido dafacrônico seguido por DMEM pH 7,4 suplementado ou não com reagente de Fildes. Em DMEM pH 7,4 a 37°C, a suplementação com células Caco-2 foi comparada à suplementação com Fildes. No Dia 14, as taxas de desenvolvimento até o quarto estádio larvar (L4) foram similares em meio ácido sem células suplementado (86,8?88,4%) ou não (74,4?77,8%) com Fildes e em co-cultura com células Caco-2 (92,6%), e superiores ao desenvolvimento em DMEM pH 7,4 com Fildes (0,0%). No Dia 21, o co-cultivo com células Caco-2 resultou em maior diferenciação (25,0%) e menor degeneração (13,9%) das larvas em comparação ao meio ácido (1,5?8,1% e 48,6?69,9%, respectivamente). Este é o primeiro relato de cultivo in vitro prolongado de H. contortus em meio comercial em co-cultivo com células Caco-2. Apesar da ausência de progressão até o estágio adulto, o co-cultivo com células Caco-2 resultou em diferenciação de L4 e manutenção da viabilidade das larvas de H. contortus por até 28 dias in vitro.  aGastrointestinal nematodes  aSheep  aNematóide  aOvino  aVerminose  aCultivo in vitro de longa duração  aFourth stage larvae  aLarva de quarto estádio  aNematoide gastrintestinal  aNematoides gastrintestinais  aOvinos  aProlonged in vitro culture  aReplacement of in vivo methods  aSubstituição de metodologias in vivo1 aMINHO, A. P.1 aMCINTYRE, J.1 aBENAVIDES, M. V.1 aOKINO, C. H.1 aESTEVES, S. N.1 aCHAGAS, A. C. de S.1 aAMARANTE, A. F. T. DO  tRevista Brasileira de Parasitologia Veterináriagv. 32, n. 1, 2023, e010122.