04904nam a2200361 a 450000100080000000500110000800800410001910000200006024501170008026000160019730000160021350002240022952037120045365000150416565000150418065000170419565000120421265000220422465000270424665000160427365000190428965000130430865000210432165000290434265000100437165000140438165000220439565300270441765300400444465300240448465300130450865300210452121302832023-08-22       2020    bl uuuu  m   00u1 u    #d1 aSILVA, V. B. da  aMicro-organismos colonizadores de nódulos de Vigna spp. cultivadas em solos de Caatinga.h[electronic resource]  a2020.c2020  a158 f.cil.  aTese (Doutorado em Ciência do Solo). Universidade Federal da Paraíba, Centro de Ciências Agrárias, Areia-PB. Orientado por Adailson Pereira de Souza; coorientado por Paulo Ivan Fernandes Júnior. Embrapa Semiárido.  aO estudo da diversidade de micro-organismos nativos do Semiárido brasileiro, é promissor, tanto para conhecimento da biodiversidade, como para selecionar estirpes bacterianas eficientes na fixação de nitrogênio, e no biocontrole de fitopatógenos, melhorando a produtividade do feijão-caupi na região. Os objetivos desse trabalho foi realizar a caracterização molecular de micro-organismos endofíticos de nódulos de Vigna spp., cultivados em solos de Caatinga do Semiárido, avaliar o efeito simbiótico das bactérias na fixação de N e no biocontrole de fitopatógenos em feijão-caupi. Para isolamento dos microorganismos foi montado um experimento com planta isca utilizando três espécies de Vigna: Vigna mungo; Vigna radiata, e Vigna unguiculata (BRS Pujante, BRS Novaera e Vigna unguiculata subsp. Sesquipedalis) cultivadas em cinco áreas de Caatinga com baixo grau de antopização dos estados de Pernambuco, Piauí e Bahia, resultando em uma coleção com 646 b ctérias e 23 fungos endofíticos. O primeiro estudo desenvolveu e validou um método a amplificação simultânea dos genes nodC e nifH, em reações de duplex PCR. A diversidade genética dos isolados rizobianos foi avaliada pela Análise de Restrição do DNA Ribossomal Amplificado (ARDRA), da qual foram selecionados 78 isolados representantes de todos os grupos para sequenciamento do gene 16S rRNA. 41 isolados tiveram os genes nodC, recA,dnaK e gyrB sequenciados. Para avaliação da eficiência simbiótica dos 41 isolados, foram realizados dois ensaios, sendo um de vasos em condições gnotobióticas, e outro de vasos com solo, em viveiro. O segundo estudo caracterizou geneticamente a coleção de fungos endofíticos pela análise de perfis gerados pelo marcador microssatélite (GTG)5, e pelo sequenciamento da região ITS1-5.8S-ITS2. A patogenicidade de 18 fungos, na germinação sementes de feijão-caupi, foi avaliada em dois ensaios sendo um em placas de Petri e outro em vasos em condições gnotobióticas. O potencial de biocontrole das bactérias foi avaliado em experimento de vasos com substrato esterilizado, pela coinoculação de fungos patogênicos e bactérias isoladas dos nódulos das respectivas plantas e solos. O terceiro estudo avaliou a variabilidade genética de uma coleção montada com rizóbios isolados de nódulos de feijão-caupi cultivados em solos de Caatinga com baixo grau de antropização dos estados do Ceará e Rio Grande do Norte. A caracterização genética foi realizada por meio de ARDRA e análise dos perfis de BOX PCR, viabilizando a seleção de 26 isolados que tiveram o gene 16S rRNA, sequenciado. Dentre estas, 15 bactérias tiveram os genes constitutivos recA, dnaK e gyrB sequenciados e prosseguiram para avaliação do potencial simbiótico em ensaio com vasos em condições gnotobióticas. Este estudo mostrou que os solos do Semiárido são fontes de bactérias diversas pertencentes a diferentes grupos taxonômicos, com espécies possivelmente ainda não descritas. Foram identificados na coleção bacteriana, rizóbios dos gêneros: Bradyrhizobium, Rhizobium, Agrobacterium, Ensifer, Mesorhizobium, Microvirga, e Paraburkholderia; além dos não nodulantes: Bacillus spp., Enterobacter spp., Pseusdomonas spp.. Os fungos endofíticos pertencem aos gêneros: Nigrospora, Fusarium, Macrophomina, Aspergillus, Cladosporium. Os quatro últimos com estirpes patogênicas na germinação de sementes de feijão-caupi. As coleções apresentam bactérias que se destacaram na associação simbiótica com feijão-caupi, mostrando-se eficientes na fixação de N, e no biocontrole de fungos patogênicos, sendo selecionados para futuros ensaios de campo.  aAcid soils  aArid soils  aBiodiversity  aCowpeas  aNitrogen fixation  aPlant pathogenic fungi  aRhizobiales  aBiodiversidade  aCaatinga  aFeijão de Corda  aFixação de Nitrogênio  aFungo  aPatógeno  aVigna Unguiculata  aBiocontrole microbiano  aFixação biológica do nitrogênio  aFungos patogênicos  aRizóbio  aSolo da Caatinga