02966nam a2200301 a 450000100080000000500110000800800410001910000190006024501490007926000690022849000960029752020020039365000150239565000180241065000130242865000240244165000120246565000200247765000090249770000150250670000230252170000180254470000220256270000200258470000230260470000170262770000200264420924812022-03-23       2018    bl uuuu     u0uu1 u    #d1 aSANCHES, M. M.  aAvaliação de co-infecção de Anticarsia gemmatalis MNPV e Chrysodeixis includens NPV em cultura de células de inseto.h[electronic resource]  aBrasília, DF: Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologiac2018  a(Boletim de Pesquisa e Desenvolvimento / Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia, 333).  aOs baculovírus Anticarsia gemmatalis multiple nucleopolyhedrovirus (AgMNPV) e Chrysodeixis includens nucleopolyhedrovirus (ChinNPV) que infectam duas importantes pragas da soja, Anticarsia gemmatalis e Chrysodeixis includens, respectivamente, foram testados a respeito da infectividade a diferentes linhagens celulares. As linhagens celulares, IPLBSF-21AE, Sf9 e BTI-Tn-5B1-4, foram previamente definidas como produtivas para infecção de AgMNPV. Neste trabalho a susceptibilidade destas linhagens à infecção simples por ChinNPV e infecção mista de ChinNPV e AgMNPV foram testadas. As células foram semeadas a uma densidade de 1X106 por placa de 60mm2. Os vírus foram obtidos a partir de hemolinfa de larvas infectadas, aos 4 dias pós-infecção (d.p.i.), e adsorvidos a células durante 1 hora (P0). Células infectadas foram mantidas em meio TNMFH completo a 27°C. As células foram inicialmente monitoradas por microscópio ótico durante cinco dias para realizar as análises morfológicas. Posteriormente, os sobrenadantes foram coletados para novas infecções (P1) usando o mesmo procedimento. Aos 5 d.p.i., os sobrenadantes foram coletados para a segunda passagem (P2). A ultraestrutura dos corpos de oclusão foi analisada por Microscopia Eletrônica de Transmissão para a passagem P0. A quantidade de DNA obtida dos Budded Virus (BVs) das três passagens foi monitorada por PCR em tempo real (qPCR) usando sistema Sybr green com primers desenhados para gp64 de AgMNPV e photolyase de ChinNPV. Bioensaios foram realizados com larvas de A. gemmatalis e C. includens para comprovação de co-oclusão na dose estimada de 1 poliedro/larva. Os resultados demonstraram sucesso na co-infecção nestas células, mas a quantidade de ChinNPV tende a diminuir nas passagens seriais, enquanto a quantidade de AgMNPV tende a aumentar na primeira passagem e estabilizar na segunda passagem. Os resultados de bioensaios comprovaram a presença de poliedros co-ocluidos com ambos os vírus.  aAnticarsia  aBaculoviridae  aSoybeans  aControle Biológico  aLagarta  aPraga de Planta  aSoja1 aSIHLER, W.1 aGOMES, A. C. M. M.1 aBENITO, N. P.1 aSOSA-GOMEZ, D. R.1 aSILVA, C. E. P.1 aFERREIRA, M. B. C.1 aGOMES, S. D.1 aSOUZA, M. L. de