02633naa a2200289 a 450000100080000000500110000800800410001910000180006024501460007826000090022450001260023352016570035965000110201665000380202765000130206565000330207865000110211165000100212265000250213265000140215765000110217165300100218265300150219265300160220770000230222377300970224620894952018-03-21       2017    bl uuuu     u00u1 u    #d1 aMAIOLI, M. A.  aPadronização da quantificação do fator de crescimento semelhante à insulina I (IGF-I) em plasma bovino por ELISA.h[electronic resource]  c2017  aTítulo em inglês: Standardization of ELISA for the measurement of Insulin-Like Growth Factor I (IGF-I) in bovine plasm.  aEsse estudo teve como objetivo a padronização de um ensaio imunoenzimático competitivo (cELISA) in house para a determinação das concentrações plasmáticas do fator de crescimento semelhante a insulina I (IGF-I) total para a espécie bovina, utilizando o sistema de amplificação biotina-streptavidina peroxidase. O IGF-I foi extraído das proteínas ligadoras do fator de crescimento semelhante a insulina I (IGFBP), utilizando o tampão glicina acidificado seguido de neutralização do pH com hidróxido de sódio. As microplacas foram sensibilizadas com anti IgG de coelho, e as dosagens realizadas utilizando duas abordagens, um método com incubação prévia das amostras com o anticorpo anti-h-IGF-I e outro sem incubação prévia (adição simultânea de IGF-I biotilinado e amostra). Os melhores resultados foram obtidos utilizando o método sem incubação prévia, com a sensibilização da placa com 0,25μg/poço de anti-IgG de coelho, o anticorpo específico na diluição 1:250.000 e 0,06ng/poço de IGF-I biotinilado. O ensaio in house apresentou um limite inferior de detecção de 50ng/mL, uma correlação de 0,945 entre doses quando comparado a uma metodologia comercial. Os coeficientes de variação inter-ensaio de 12,94% (345,8ng/mL) para os controles alto e 20,71% (131,6ng/mL) para o baixo. Dessa forma, conclui-se que a metodologia imunoenzimática para quantificação de IGF-I total utilizando o sistema de amplificação biotina estreptavidina peroxidase em um ensaio competitivo está estabelecida e apresenta-se como uma ferramenta útil para estudos que visem o monitoramento das concentrações de IGF-I.  aCattle  aEnzyme-linked immunosorbent assay  aHormones  aInsulin-like growth factor I  aBovino  aELISA  aFator de crescimento  aHormônio  aPlasma  aIGF-I  aInsulina I  aValidação1 aNOGUEIRA, G. de P.  tPesquisa Veterinária Brasileira, Brasília, DFgv. 37, n. 12, p. 1545-1553, dezembro. 2017.