02007naa a2200241 a 450000100080000000500110000800800410001910000290006024500960008926000090018552013000019465000200149465000280151465000230154265300190156565300170158470000220160170000170162370000180164070000180165870000200167677300690169620825042017-12-13       2017    bl uuuu     u00u1 u    #d1 aSANTOS JUNIOR, A. G. dos  aAvaliação de métodos para obtenção de proteínas recombinantes.h[electronic resource]  c2017  aA utilização de Pichia pastoris para a produção de proteínas recombinantes apresenta inúmeras vantagens que esse sistema agrega, destacando-se a exportação das moléculas para o meio extracelular. Isto permite que a obtenção das proteínas possa ser realizada por métodos de precipitação, com uso de sais neutros ou solventes orgânicos, sem trazer prejuízos. O objetivo deste trabalho foi avaliar a utilização de sulfato de amônio, acetona e metanol para obtenção da proteína recombinante Bm86 do carrapato Rhipicephalus microplus expressa por P. pastoris. A ação provocada pelos solventes orgânicos ocasionou uma solubilidade parcial das proteínas. Na quantificação por densitometria da proteína rBm86-CG, verificou-se que utilizando acetona (1:2) foi obtido 30,3 mg/L, metanol (1:2) 60,5 mg/L e com sulfato de amônio a 70% (83,5 mg/L). A manutenção das características antigênicas após a precipitação foi verificada pela técnica de Western Blot, sendo que a proteína rBm86-CG obtida pelos três métodos foi reconhecida por anticorpos específicos. Os resultados sugerem que a precipitação com sais neutros e solventes orgânicos pode ser utilizada para obtenção de proteínas recombinantes como a rBm86-CG, sem trazer prejuízos a sua antigenicidade.  aPichia pastoris  aRhipicephalus microplus  aSolvente orgânico  aAntigenicidade  aSais neutros1 aPIRAINE, R. E. A.1 aCUNHA, R. C.1 aNIZOLI, L. Q.1 aANDREOTTI, R.1 aLEITE, F. P. L.  tScience and Animal Healthgv.5, n.2, p. 166-177, maio/ago. 2017.