04031naa a2200457 a 450000100080000000500110000800800410001902400490006010000210010924501240013026000090025452027310026365000260299465000100302065000190303065000140304965000130306365000140307665000120309065000170310265000190311965000100313865000150314865300310316365300090319465300390320365300090324265300140325165300090326570000200327470000200329470000160331470000170333070000170334770000170336470000220338170000170340370000250342070000230344577301050346820006562019-04-08       2014    bl uuuu     u00u1 u    #d7 ahttp://dx.doi.org/10.1590/1678-416263032DOI1 aRODRIGUES, A. S.  aPadronização do Elisa indireto e Western Blot para diagnóstico da artrite-encefalite caprina.h[electronic resource]  c2014  aResumo: A artrite-encefalite caprina (CAE) é diagnosticada rotineiramente pela técnica de imunodifusão em gel de agarose (IDGA), que é considerada pouco sensível. Objetivou-se com este estudo padronizar testes de Elisa-i e Western Blot (WB) para diagnóstico precoce de anticorpos em caprinos contra CAEV e comparar os resultados obtidos nesses testes com a prova de IDGA. Para a padronização dos testes Elisa-i e WB, utilizaram-se diferentes concentrações e diluições de antígeno, soros e conjugado. No Elisa-i, adotaram-se microplacas rígidas com 96 poços, sendo a combinação de concentração de 0,5µg/poço de antígeno e diluições de 1:100 de soro e 1:1500 de conjugado a que apresentou melhor resultado. No WB foram utilizadas membranas de nitrocelulose, definindo-se as diluições de 1:50 de soro e 1:15000 de conjugado. Para avaliar o desempenho das técnicas, 222 amostras de soro caprino foram testadas e os dados obtidos foram comparados com o IDGA. A sensibilidade e a especificidade do Elisa-i/IDGA, WB/IDGA e WB/Elisa-i foram de 70% e 91%, 100% e 72,6%, 84,6% e 76,5%, concomitantemente. O índice Kappa desses testes foi de 0,35, 0,2 e 0,36, respectivamente. As técnicas de Elisa-i e WB apresentaram-se mais sensíveis que a IDGA, podendo ser utilizadas como ferramentas para o diagnóstico precoce da CAE. [Standardization of indirect Elisa and Western Blot for diagnosis of Caprine Arthritis-Encephalitis]. Abstract: Caprine arthritis-encephalitis (CAE) is routinely diagnosed with the Agarose Gel Immunodiffusion (AGID) technique, which is considered to have low sensitivity. The objective of this study was to standardize testing i-Elisa and Western Blot for early detection of antibodies against CAEV in goats and compare the results obtained in these tests with proof of AGID. For standardization of i-Elisa and WB, different concentrations and dilutions of antigen, sera and conjugate were used. In the i-Elisa, rigid microplate with 96 wells was adopted, and the combination that showed the best result was a concentration of 0.5µg/ well of antigen and dilutions of the serum of 1:100 and conjugate of 1:1500. In the WB nitrocellulose membranes were used, and the dilutions of the serum were defined at 1:50 and conjugate at 1:15000. To evaluate the performance of the techniques, 222 goat serum samples were tested and the data were compared with the AGID. The sensitivity and specificity of Elisa-i/IDGA, WB/AGID and WB/Elisa-i were 70% and 91%, 100% and 72.6%, 84.6% and 76.5%, concomitantly. The Kappa index of these tests was 0.35, 0.2 and 0.36, respectively. The i-Elisa and WB techniques were more sensitive than the AGID and can be used as tools for early diagnosis of CAE.  aDiagnostic techniques  aGoats  aImmunoblotting  aInfection  aSerology  aAnticorpo  aCaprino  aDiagnóstico  aDoença animal  aElisa  aInfecção  aArtrite-encefalite caprina  aCAEV  aCaprine arthritis encephalit virus  aLVPR  aSorologia  aSRLV1 aBRITO, R. L. L.1 aPINHEIRO, R. R.1 aDIAS, D. P.1 aALVES, S. M.1 aSOUZA, T. S.1 aSOUZA, K. C.1 aAZEVEDO, D. A. A.1 aANDRIOLI, A.1 aMAGALHÃES, D. C. T.1 aTEIXEIRA, M. F. S.  tArquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia, Viçosa, MGgv. 66, n. 2, p. 417-424, 2014.