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| Registros recuperados : 182 | |
| 61. |  | MIGLIORANZA, E.; ARAÚJO, R. de; ENDO, R. M.; SOUZA, J. R. P. de; MONTANARI, M. A. Teor de cálcio em frutos de diferentes cultivares de feijão-vagem. Horticultura Brasileira, Brasília, v. 21, n. 2, p. 159-162, abr./jun. 2003.| Biblioteca(s): Embrapa Hortaliças. |
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| 62. | | AMARAL, J. L. de; MEDEIROS, M. O.; OLIVEIRA, C.; BORGES, V.; SOUZA, J. R. Utilizacao de calcario, gesso e NPK na renovacao de pastagens em solos arenosos e acidos, visando ao controle do Percevejo-castanho-das-raizes Atarsocoris brachiariae Becker, 1996. In: WORKSHOP SOBRE PERCEVEJO CASTANHO DA RAIZ, 1999, Londrina, PR. Ata e resumos. Londrina: Embrapa Soja, 1999. p.45-46. (Embrapa Soja. Documentos, 127).| Biblioteca(s): Embrapa Cerrados. |
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| 63. | | GUARITÁ-SANTOS, A. J. M.; IMBROISE, D.; SOUZA, J. R. de; DUVERNEUIL, P.; FENOUILLET, B. Utilização de carvão vegetal como eletrodo poroso percolado em reatores eletroquímicos: estudo da condutividade do leito granular de carvão ativado. Brasil Florestal, Brasília, DF, v. 22, n. 78, p. 43-52, dez. 2003.| Biblioteca(s): Embrapa Florestas. |
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| 65. | | SOUZA, J. R. de; RIBEIRO, B. N.; RAPOSO, T. P.; FIORIN, J. E.; CASTRO, G. S. A.; MAGALHÃES, R. S. Eficiência do fósforo revestido com polímeros na cultura da soja. Acta Iguazu, Cascavel, v. 3, n. 4, p. 1-9, 2014.| Biblioteca(s): Embrapa Amapá. |
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| 66. | | RAPOSO, T. P.; SOUZA, J. R. de; RIBEIRO, B. N.; ROLIM, M. V.; CASTRO, G. S. A. Eficiência da ureia revestida com polímeros, na produtividade de milho safrinha. In: SEMINÁRIO NACIONAL [DE] MILHO SAFRINHA, 12., 2013, Dourados. Estabilidade e produtividade: anais. Brasília, DF: Embrapa; Dourados: Embrapa Agropecuária Oeste, 2013. Editado por: Germani Concenço, Gessi Ceccon. Disponível em: http://www.cpao.embrapa.br/cds/milhosafrinha2013/PDF/61.pdf. Acesso em 18 dez. 2013.| Biblioteca(s): Embrapa Amapá. |
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| 67. | | SILVA, J. G. da; SILVA, L. P. da; SOUZA, J. R. de; CASTRO, C. S. P. de. Interação entre a enzima catalase e os íons Cu(II): sítios de ligação, estequiometria, Kd e E° por CV, DPV e ferramentas teóricas. In: REUNIÃO ANUAL DA SOCIEDADE BRASILEIRA DE QUÍMICA, 31, 2008, Águas de Lindóia, SP. Programa e resumos... São Paulo: Sociedade Brasileira de Química, 2008.| Biblioteca(s): Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia. |
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| 69. | | GARCIA, D. P.; ULHÔA, J. L. R.; VALICENTE, F. H.; CARVALHO, S. M.; CARVALHO, C. F.; SOUZA, J. R. Interação tritrófica de Schizaphis graminum (Rondani) alimentado com milho bt sobre Chrysoperla externa (Hagen). In: CONGRESSO BRASILEIRO DE ENTOMOLOGIA, 25., 2014, Goiânia. Resumos... Santo Antônio de Goiás: Sociedade Entomológica do Brasil, 2014. p. 744| Biblioteca(s): Embrapa Milho e Sorgo. |
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| 70. | | SOUZA, J. R.; BONFIM, K. S.; LOREVICE, M. V.; CORREA, D. S.; MATTOSO, L. H. C.; MOURA, M. R. de. Antibacterial properties of oregano essential oil encapsulated in poly (épsilon-Caprolactone) nanoparticles. Advanced Science, Engineering and Medicine, v. 12, n. 7, 2020. 864-869| Biblioteca(s): Embrapa Instrumentação. |
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| 72. | | RAPOSO, T. P.; MAGALHÃES, R. S.; SOUZA, J. R. de; MINGOTTE, F. L. C.; CASTRO, G. S. A.; CARVALHO, A. Alteração da agregação de um latossolo vermelho-amarelo em função do preparo físico. Science and Technology Innovation in Agronomy, Bebedouro, v. 2, n. 1, p. 72-82, mar. 2018. p. 72-82| Biblioteca(s): Embrapa Territorial. |
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| 73. | | SOUZA, J. R. de; CASTRO, G. S. A.; RIBEIRO, B. N.; ROLIM, M. V.; KANEKO, F. H. Manejo de nitrogênio revestido com polímeros na cultura do algodão. Acta Iguazu, Cascavel, v. 2, n. 1, p. 43-49, 2013.| Biblioteca(s): Embrapa Amapá. |
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| 74. | | SOUZA, J. R.; SILVA, C. G.; BARRIGOSSI, J. A. F.; MATOS JUNIOR, J. B.; CONCEIÇÃO, D. P.; SOUSA, G. O. Biology of Glyphepomis dubia Campos & Souza, 2016 (Hemiptera: Pentatomidae) and the parasitoids Telenomus podisi Ashmead, 1893 and Trissolcus basalis (Wollaston, 1858) (Hymenoptera: Platygastridae) on rice. Brazilian Journal of Biology, v. 83, e247433, 2023.| Biblioteca(s): Embrapa Arroz e Feijão. |
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| 75. | | ULHÔA, J. L. R.; VALICENTE, F. H.; CARVALHO, S. M.; CARVALHO, C. F.; GARCIA, D. P.; SOUZA, J. R. Efeito do Bacillus thuringiensis (Berliner) incorporado a dietas para adultos de Chrysoperla externa (Hagen) sobre longevidade. In: CONGRESSO BRASILEIRO DE ENTOMOLOGIA, 25., 2014, Goiânia. Resumos... Santo Antônio de Goiás: Sociedade Entomológica do Brasil, 2014. p. 733| Biblioteca(s): Embrapa Milho e Sorgo. |
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| 76. | | GOMES, D. P.; LEITE, R. M. V. B. C.; KRONKA, A. Z.; SILVA, G. C.; SOUZA, J. R. Efeito da incidência de fungos na qualidade de sementes de girassol produzidas em São Luís, Maranhão. Fitopatologia Brasileira, Brasília, DF, v. 32, p. S271, ago. 2007. Suplemento, resumo 0811. Edição dos Resumos do XL Congresso Brasileiro de Fitopatologia, Maringá, PR, ago. 2007.| Biblioteca(s): Embrapa Soja. |
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| 77. | | ROSSI, L. M. B.; AZEVEDO, C. P. de; SOUZA, J. R. de; COSTA, M. S. B. da. Efeito da exploração em floresta sob manejo sustentável em escala comercial na Amazônia Central. In: SIMPÓSIO LATINO-AMERICANO SOBRE MANEJO FLORESTAL, 2., 2001, Santa Maria. [Anais]. Santa Maria: Universidade Federal de Santa Maria, Centro de Ciências Rurais, Departamento de Ciências Florestais, 2001. p. 319-333.| Biblioteca(s): Embrapa Florestas. |
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| 78. | | ROSSI, L. M. B.; AZEVEDO, C. P. de; SOUZA, J. R. de; COSTA, M. S. B. da. Efeito da exploração em floresta sob manejo sustentável em escala comercial na Amazônia Central. In: SIMPÓSIO LATINO-AMERICANO SOBRE MANEJO FLORESTAL, 2., 2001, Santa Maria. [Anais]. Santa Maria: Universidade Federal de Santa Maria, Centro de Ciências Rurais, Departamento de Ciências Florestais, 2001. p. 319-333.| Biblioteca(s): Embrapa Amazônia Ocidental. |
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| 79. | | CARNEIRO, R. M. D. G.; ALMEIDA, M. R. A.; MARTINS, I.; SOUZA, J. R.; PIRES, A. Q.; TIGANO, M. S. Ocorrência de Meloidogyne spp. e fungos nematófagos em hortaliças no Distrito Federal, Brasil. Nematologia Brasileira, Piracicaba, v. 32, n. 2, p. 135-141, 2008.| Biblioteca(s): Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia. |
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| 80. | | ROSSI, L. M. B.; AZEVEDO, C. P. de; SOUZA, J. R. de; COSTA, M. S. B. da. Selective logging impacts on abundance, basal area and volume in tropical forest under sustainable management. In: CONFERENCE ON FOREST VEGETATION MANAGEMENT, 4., 2002, Nancy. Technical, environmental and economic challenges: popular summaries. Champenoux: Institut National de la Recherche Agronomique, 2002. p. 326-328.| Biblioteca(s): Embrapa Amazônia Ocidental. |
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| Registros recuperados : 182 | |
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Registro Completo
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Biblioteca(s): |
Embrapa Pecuária Sudeste. |
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Data corrente: |
10/11/2009 |
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Data da última atualização: |
10/05/2016 |
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Tipo da produção científica: |
Resumo em Anais de Congresso |
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Autoria: |
IBELLI, A. M. G.; RIBEIRO, A. R. B.; SOUZA, J. R. T. de; ALENCAR, M. M. de; REGITANO, L. C. de A. |
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Afiliação: |
ADRIANA MÉRCIA QUARATINI IBELLI, UFSCar; ANDREA ROBERTO BUENO RIBEIRO, SECRETARIA DA AGRICULTURA DE SÃO PAULO; JULIANA ROBERTA TORINI DE SOUZA, UNICEP/SÃO CARLOS; MAURICIO MELLO DE ALENCAR, CPPSE; LUCIANA CORREIA DE A. REGITANO, CPPSE. |
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Título: |
Escolha e padronização de um protocolo de hemólise de amostras para extração de RNA. |
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Ano de publicação: |
2009 |
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Fonte/Imprenta: |
In: JORNADA CIENTÍFICA-EMBRAPA SÃO CARLOS, 2009, São Carlos, SP. Anais... São Carlos, SP: Embrapa Pecuária Sudeste: Embrapa Instrumentação Agropecuária, 2009. Editado por Luiz Francisco Zafalon, Simone Cristina Méo Niciura. |
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Páginas: |
p. 21 |
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Idioma: |
Português |
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Conteúdo: |
Estudos de regulação da expressão gênica dependem de amostras de RNA de alta pureza e integridade. A maioria das coletas de amostras para esses estudos ocorre a campo e, em grande parte das vezes, em diferentes momentos do experimento, exigindo que o transporte, a estocagem e o isolamento do RNA sejam adequados para que material de boa qualidade seja obtido. Dessa maneira, os objetivos deste trabalho foram: testar soluções de hemólise existentes na literatura e verificar a qualidade do RNA extraído após o processamento das amostras em diferentes tempos do experimento. Foram utilizadas amostras de sangue provenientes da Embrapa Pecuária Sudeste, São Carlos, SP. Em um primeiro teste, dois protocolos de obtenção de leucócitos a partir de amostras de sangue total foram avaliados. No primeiro, as amostras foram mantidas em gelo e, então, transferidas para um tubo de 15 mL, em que se adicionavam 10 mL de tampão de hemólise contendo 10 mM de Tris.HCl pH 7,6, 5 mM de MgCl2 e 10 mM de NaCl. A seguir, as amostras foram homogeneizadas e centrifugadas por 10 min a 3000 rpm, por 2 ou 3 vezes. No segundo teste, após a coleta, as amostras mantidas em gelo foram transferidas para tubo de 50 mL e centrifugadas por 5 minutos a 2500 rpm a 4oC. Após descarte do plasma, a solução de hemólise contendo 0,1444M de NH4Cl e 0,01M de NH4HCO3 foi adicionada, e as amostras foram agitadas vigorosamente, mantidas em gelo por cerca de 30 minutos e centrifugadas por 10 minutos a 3.000 rpm a 4oC. O sobrenadante foi descartado e essa etapa foi repetida uma vez. Em seguida, as extrações de RNA foram feitas seguindo o protocolo tradicional do reagente Trizol (Invitrogen). Após a escolha da melhor solução hemólise, foi realizado um segundo teste com amostras de sangue processadas 20 minutos, 1 hora, 4 horas e 8 horas após o horário inicial da coleta. Nos dois testes, as amostras foram quantificadas em espectrofotômetro Nanodrop, para verificar a qualidade e a quantidade do RNA, e após eletroforese gel de agarose 1%, para observar a integridade. Os resultados da eletroforese para o primeiro teste evidenciaram que o melhor método para obtenção de leucócitos foi com a solução de hemólise contendo NH4Cl e NH4HCO3, já que não foi observada degradação das amostras de RNA. Os resultados obtidos no segundo teste mostraram que não houve diferença na integridade do RNA após eletroforese no intervalo de tempo de 20 minutos a 8 horas entre a coleta e o processa mento das amostras, que foram sempre mantidas em gelo. O mesmo foi observado quando o RNA foi mensurado no espectrofotômetro, já que todas as amostras apresentaram razão 260/280nm maior que 1,9 e quantidades maiores que 20 ?g. Pode-se dizer, então, que amostras de sangue podem ser mantidas em gelo até 8 horas antes de serem processadas para a extração de RNA. MenosEstudos de regulação da expressão gênica dependem de amostras de RNA de alta pureza e integridade. A maioria das coletas de amostras para esses estudos ocorre a campo e, em grande parte das vezes, em diferentes momentos do experimento, exigindo que o transporte, a estocagem e o isolamento do RNA sejam adequados para que material de boa qualidade seja obtido. Dessa maneira, os objetivos deste trabalho foram: testar soluções de hemólise existentes na literatura e verificar a qualidade do RNA extraído após o processamento das amostras em diferentes tempos do experimento. Foram utilizadas amostras de sangue provenientes da Embrapa Pecuária Sudeste, São Carlos, SP. Em um primeiro teste, dois protocolos de obtenção de leucócitos a partir de amostras de sangue total foram avaliados. No primeiro, as amostras foram mantidas em gelo e, então, transferidas para um tubo de 15 mL, em que se adicionavam 10 mL de tampão de hemólise contendo 10 mM de Tris.HCl pH 7,6, 5 mM de MgCl2 e 10 mM de NaCl. A seguir, as amostras foram homogeneizadas e centrifugadas por 10 min a 3000 rpm, por 2 ou 3 vezes. No segundo teste, após a coleta, as amostras mantidas em gelo foram transferidas para tubo de 50 mL e centrifugadas por 5 minutos a 2500 rpm a 4oC. Após descarte do plasma, a solução de hemólise contendo 0,1444M de NH4Cl e 0,01M de NH4HCO3 foi adicionada, e as amostras foram agitadas vigorosamente, mantidas em gelo por cerca de 30 minutos e centrifugadas por 10 minutos a 3.000 rpm a 4oC. O sobrenada... Mostrar Tudo |
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Palavras-Chave: |
Protocolo. |
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Thesagro: |
Extração; RNA. |
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Categoria do assunto: |
-- |
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URL: |
https://ainfo.cnptia.embrapa.br/digital/bitstream/CPPSE-2010/18749/1/PROCIMMA2009.00185.pdf
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Marc: |
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245 $aEscolha e padronização de um protocolo de hemólise de amostras para extração de RNA.
260 $aIn: JORNADA CIENTÍFICA-EMBRAPA SÃO CARLOS, 2009, São Carlos, SP. Anais... São Carlos, SP: Embrapa Pecuária Sudeste: Embrapa Instrumentação Agropecuária, 2009. Editado por Luiz Francisco Zafalon, Simone Cristina Méo Niciura.$c2009
300 $ap. 21
520 $aEstudos de regulação da expressão gênica dependem de amostras de RNA de alta pureza e integridade. A maioria das coletas de amostras para esses estudos ocorre a campo e, em grande parte das vezes, em diferentes momentos do experimento, exigindo que o transporte, a estocagem e o isolamento do RNA sejam adequados para que material de boa qualidade seja obtido. Dessa maneira, os objetivos deste trabalho foram: testar soluções de hemólise existentes na literatura e verificar a qualidade do RNA extraído após o processamento das amostras em diferentes tempos do experimento. Foram utilizadas amostras de sangue provenientes da Embrapa Pecuária Sudeste, São Carlos, SP. Em um primeiro teste, dois protocolos de obtenção de leucócitos a partir de amostras de sangue total foram avaliados. No primeiro, as amostras foram mantidas em gelo e, então, transferidas para um tubo de 15 mL, em que se adicionavam 10 mL de tampão de hemólise contendo 10 mM de Tris.HCl pH 7,6, 5 mM de MgCl2 e 10 mM de NaCl. A seguir, as amostras foram homogeneizadas e centrifugadas por 10 min a 3000 rpm, por 2 ou 3 vezes. No segundo teste, após a coleta, as amostras mantidas em gelo foram transferidas para tubo de 50 mL e centrifugadas por 5 minutos a 2500 rpm a 4oC. Após descarte do plasma, a solução de hemólise contendo 0,1444M de NH4Cl e 0,01M de NH4HCO3 foi adicionada, e as amostras foram agitadas vigorosamente, mantidas em gelo por cerca de 30 minutos e centrifugadas por 10 minutos a 3.000 rpm a 4oC. O sobrenadante foi descartado e essa etapa foi repetida uma vez. Em seguida, as extrações de RNA foram feitas seguindo o protocolo tradicional do reagente Trizol (Invitrogen). Após a escolha da melhor solução hemólise, foi realizado um segundo teste com amostras de sangue processadas 20 minutos, 1 hora, 4 horas e 8 horas após o horário inicial da coleta. Nos dois testes, as amostras foram quantificadas em espectrofotômetro Nanodrop, para verificar a qualidade e a quantidade do RNA, e após eletroforese gel de agarose 1%, para observar a integridade. Os resultados da eletroforese para o primeiro teste evidenciaram que o melhor método para obtenção de leucócitos foi com a solução de hemólise contendo NH4Cl e NH4HCO3, já que não foi observada degradação das amostras de RNA. Os resultados obtidos no segundo teste mostraram que não houve diferença na integridade do RNA após eletroforese no intervalo de tempo de 20 minutos a 8 horas entre a coleta e o processa mento das amostras, que foram sempre mantidas em gelo. O mesmo foi observado quando o RNA foi mensurado no espectrofotômetro, já que todas as amostras apresentaram razão 260/280nm maior que 1,9 e quantidades maiores que 20 ?g. Pode-se dizer, então, que amostras de sangue podem ser mantidas em gelo até 8 horas antes de serem processadas para a extração de RNA.
650 $aExtração
650 $aRNA
653 $aProtocolo
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700 1 $aSOUZA, J. R. T. de
700 1 $aALENCAR, M. M. de
700 1 $aREGITANO, L. C. de A.
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Embrapa Pecuária Sudeste (CPPSE) |
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