Data/hora: 06/06/2024 14:01:44

Biblioteca(s): | Embrapa Unidades Centrais.
Data corrente: | 21/03/2018
Data da última atualização: | 21/03/2018
Autoria: | MAIOLI, M. A.; NOGUEIRA, G. de P.
Afiliação: | Marcos Antonio Maioli, Departamento de Apoio a Produção e Saúde Animal/Faculdade de Medicina Veterinária/Universidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho - Unesp; Guilherme de Paula Nogueira, Departamento de Apoio a Produção e Saúde Animal/Faculdade de Medicina Veterinária/Universidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho - Unesp.
Título: | Padronização da quantificação do fator de crescimento semelhante à insulina I (IGF-I) em plasma bovino por ELISA.
Ano de publicação: | 2017
Fonte/Imprenta: | Pesquisa Veterinária Brasileira, Brasília, DF, v. 37, n. 12, p. 1545-1553, dezembro. 2017.
Idioma: | Português
Notas: | Título em inglês: Standardization of ELISA for the measurement of Insulin-Like Growth Factor I (IGF-I) in bovine plasm.
Conteúdo: | Esse estudo teve como objetivo a padronização de um ensaio imunoenzimático competitivo (cELISA) in house para a determinação das concentrações plasmáticas do fator de crescimento semelhante a insulina I (IGF-I) total para a espécie bovina, utilizando o sistema de amplificação biotina-streptavidina peroxidase. O IGF-I foi extraído das proteínas ligadoras do fator de crescimento semelhante a insulina I (IGFBP), utilizando o tampão glicina acidificado seguido de neutralização do pH com hidróxido de sódio. As microplacas foram sensibilizadas com anti IgG de coelho, e as dosagens realizadas utilizando duas abordagens, um método com incubação prévia das amostras com o anticorpo anti-h-IGF-I e outro sem incubação prévia (adição simultânea de IGF-I biotilinado e amostra). Os melhores resultados foram obtidos utilizando o método sem incubação prévia, com a sensibilização da placa com 0,25&#956;g/poço de anti-IgG de coelho, o anticorpo específico na diluição 1:250.000 e 0,06ng/poço de IGF-I biotinilado. O ensaio in house apresentou um limite inferior de detecção de 50ng/mL, uma correlação de 0,945 entre doses quando comparado a uma metodologia comercial. Os coeficientes de variação inter-ensaio de 12,94% (345,8ng/mL) para os controles alto e 20,71% (131,6ng/mL) para o baixo. Dessa forma, conclui-se que a metodologia imunoenzimática para quantificação de IGF-I total utilizando o sistema de amplificação biotina estreptavidina peroxidase em um ensaio competitivo está estabelecida e apresenta-se como uma ferramenta útil para estudos que visem o monitoramento das concentrações de IGF-I.
Palavras-Chave: | IGF-I; Insulina I; Validação.
Thesagro: | Bovino; ELISA; Fator de crescimento; Hormônio; Plasma.
Thesaurus Nal: | Cattle; Enzyme-linked immunosorbent assay; Hormones; Insulin-like growth factor I.
Categoria do assunto: | --
URL: | http://ainfo.cnptia.embrapa.br/digital/bitstream/item/174228/1/Padronizaao-da-quantificacao-da-fator-de-crescimento.pdf
Registro original: | Embrapa Unidades Centrais (AI-SEDE)
Exemplares: | AI-SEDE - (62322-1) - UPE - AP - DD -  -  -  - DIS