Data/hora: 07/06/2024 07:21:29

Biblioteca(s): | Embrapa Florestas.
Data corrente: | 09/02/2021
Data da última atualização: | 12/02/2021
Autoria: | MARCONDES, L. C.; PEPE, K. B. F.; SILVA, K. da.
Afiliação: | LETÍCIA CORRÊA MARCONDES, UNIVERSIDADE POSITIVO; KAUANNA BROK FERREIRA PEPE, UNIVERSIDADE CATÓLICA DO PARANÁ; KRISLE DA SILVA, CNPF.
Título: | Metodologias para caracterização molecular de bactérias metanotróficas isoladas de solos florestais.
Ano de publicação: | 2020
Fonte/Imprenta: | In: EVENTO DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA DA EMBRAPA FLORESTAS, 19., 2020, Colombo. Anais. Colombo: Embrapa Florestas, 2020. p. 17.
Série: | (Embrapa Florestas. Documentos, 343).
Idioma: | Português
Conteúdo: | Bactérias metanotróficas são capazes de utilizar o metano (CH4) como sua única fonte de carbono e podem ser uma alternativa para a redução deste gás na atmosfera. O objetivo deste trabalho foi estabelecer metodologias para a caracterização molecular de bactérias metanotróficas isoladas de solos florestais. Para a caracterização dessas bactérias, são utilizadas técnicas de extração de DNA, amplificação por PCR e sequenciamento dos genes pmoA e 16S rRNA. O experimento foi realizado com nove bactérias consideradas metanotróficas. Estas tiveram seu DNA total extraído utilizando kit Pure Link genomic DNA (Invitrogen). O PCR foi realizado por meio da amplificação do gene pmoA, utilizando os oligonucleotídeos iniciadores A189F e A682R e a combinação A189FA e o Mb661. O pmoAé um dos genes que codificam a menato monooxigenase, enzima responsável pela oxidação do CH4. Como controle positivo foi incluído DNA extraído de uma amostra de solo oriundo de floresta. Para o gene 16S rRNA, foi utilizado os oligonucleotídeos 27F e 1492R, universal para bactérias. A eficiência da extração de DNA e as amplificações foram checadas em gel de agarose 1%, corados com brometo de etídeo. A extração de DNA foi eficiente com o kit comercial. Quanto às amplificações por PCR do gene pmoA, estas não foram eficientes, resultando em ausência de ou amplificações inespecíficas, tanto para os isolados bacterianos quanto para o controle (DNA total do solo). A amplificação do gene 16S rRNA foi eficiente para todas as bactérias e o produto amplificado será enviado para sequenciamento. Portanto, conclui-se que o protocolo para a amplificação do gene pmoA necessita de ajustes.
Palavras-Chave: | 16S rRNA; Bactéria metanotrófica; Metano monooxigenase.
Thesagro: | Floresta; Metano; Solo Florestal.
Categoria do assunto: | W Química e Física
URL: | http://ainfo.cnptia.embrapa.br/digital/bitstream/item/221056/1/Doc-343-1904-Evinci-2020-final-19.pdf
Registro original: | Embrapa Florestas (CNPF)
Exemplares: | CNPF - (57572-1) - UMT - RA - DD -  -  -  - DIS