Data/hora: 19/06/2024 02:21:03

Biblioteca(s): | Embrapa Agrobiologia.
Data corrente: | 29/04/2021
Data da última atualização: | 29/04/2021
Autoria: | SOARES, I. C.
Afiliação: | ISIS CAPELLA SOARES, UFRRJ.
Título: | Avaliação da população de duas espécies diazotróficas associativas em tecidos de braquiária e milho utilizando PCR quantitativa.
Ano de publicação: | 2019
Fonte/Imprenta: | 2019
Idioma: | Português

Notas:

Dissertaçã. (Mestrado em Fissanidade e Biotecnologia Aplicada, Área de Concentração em Biotecnologia Aplicada) - Instituto de Ciências Biológicas e da Saúde, Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro. Sob a Orientação do Doutor Jean Luiz Simões de Araújo
e Co-orientação do Doutor Rafael Sanches Pacheco.

Conteúdo: | Bactérias diazotróficas dos gêneros Azospirillum e Herbaspirillum, em associação com gramíneas como o milho e forrageiras do gênero Brachiaria podem promover efeitos benéficos às plantas, como a fixação biológica de nitrogênio (FBN). A técnica de PCR quantitativa (qPCR) é eficiente no monitoramento de populações de bactérias diazotróficas inoculadas, porém sua aplicabilidade em nível de estirpe necessita de maiores estudos. Este trabalho teve o objetivo de selecionar oligonucleotídeos (primers) para posterior quantificação da população de A. brasilense em tecidos de raiz e colmo de braquiária (Brachiaria spp.) e H. seropedicae em raiz de milho (Zea mays) por qPCR. Os primers desenhados foram avaliados quanto a sua especificidade em nível de estirpe e espécie, por meio de PCR convencional. Já a sensibilidade e eficiência dos primers foram determinadas por reações de qPCR. A quantificação por qPCR estirpeespecífica de A. brasilense e H. seropedicae associadas a tecidos de braquiária e milho foi feita a partir de duas curvas-padrão diferentes. Os resultados obtidos por PCR quantitativa com os pares de primer selecionados foram comparados a contagem por microgota. A quantificação da estirpe A. brasilense Sp245 foi feita a partir do DNA extraído de tecidos de colmo e raiz de cultivares de braquiária inoculada e sem inoculação, crescidas em condições de campo. A população bacteriana das estirpes A. brasilense Sp245 e H. Seropedicae ZAE94 foi quantificada através do DNA genômico de raiz de milho inoculado com cada estirpe-alvo e plantas controle, sem inoculação, crescidas em condições de casa de vegetação com substrato estéril sob duas dosagens de N (3 e 0,3 mM). O par de primer Sp245p10, foi específico para a estirpe Sp245 e os pares de primer ZAEF1R1 e ZAEF2R2 foram específicos para a estirpe ZAE94. A quantificação, por qPCR, das estirpes Sp245 e ZAE94 apresentou resultados similares à contagem por microgota. Em relação ao experimento a campo com braquiária, o número de células bacterianas da estirpe Sp245 foi maior em plantas inoculadas das cultivares Basilik e Piatã. No experimento com milho em casa de vegetação, a dose de 3 mM de N favoreceu a população endógena de bactérias da estirpe Sp245 em plantas do tratamento controle, enquato a dose de N não interferiu na população das estirpes Sp245 e ZAE94 nas plantas inoculadas.
Palavras-Chave: | Estirpe bacteriana; Oligonucleotídeos; PCR.
Thesaurus Nal: | Azospirillum brasilense; Herbaspirillum seropedicae.
Categoria do assunto: | S Ciências Biológicas
Registro original: | Embrapa Agrobiologia (CNPAB)
Exemplares: | CNPAB - (41710-1) - UPA - TS - DD -  -  -  - DIS