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Biblioteca(s): | Embrapa Agroindústria Tropical.
Data corrente: | 23/04/2010
Data da última atualização: | 23/04/2010
Autoria: | MONTEIRO, M. B. de O.
Afiliação: | Maria Beatriz de Oliveira Monteiro, doutoranda UFRRJ.
Título: | Lignificação comparativa de Eucalyptus urophylla S. T. Blake por ferramentas biotecnológicas e polimerização in vitro.
Ano de publicação: | 2009
Fonte/Imprenta: | 2009. 134 f.
Idioma: | Português
Notas: | Tese (Doutorado em Ciências Ambientais e Florestais, UFRRJ). 29/05/2009. Co-orientadora: Ana Cristina Portugal Pinto de Carvalho, CNPAT.

Conteúdo:

Apesar dos avanços tecnológicos, a compreensão da formação estrutural da lignina
ainda é alvo de inúmeras investigações científicas. Esta pesquisa foi realizada com calos
de Eucalyptus urophylla S.T. Blake para a produção de lignina. Os calos foram obtidos
a partir de explantes de segmentos caulinares desenvolvidos em meios de cultura
acrescidos de uma combinação da citocinina TDZ e das auxinas ácidos: 3-indolacético
(AIA), a-naftalenoacético (ANA) e diclorofenoxiacético (2,4-D), nas formas isoladas e
conjugadas. Para a produção de células em suspensão foram utilizados os calos
formados no tratamento contendo 20/lM de AIA + 3/lM de TDZ, após 30 dias de cultivo
in vitro. Obtidas as células em suspensão, a produção de lignina foi induzida
empregando-se quatro elicitores: ácido jasmônico (AJ), ANA, sacarose e testemunha
(sem o emprego de elicitores). O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente
casualizado, 4 repetições e um Erlenrneyer contendo 125 ml de cultura de células em
suspensão. O teste de Wiesner confirmou a presença de lignina, em todos os tratamentos
testados. Em 3 das 4 repetições foram realizados subtratamentos para a produção de
DHPs (polímeros por desidrogenação oxidativa) a partir do filtrado da suspensão com
H202, H202 + peroxidase e peroxidase. A análise desses subtratamentos foi realizada
pela detecção da produção de polilignóis através de raios infravermelho (IV) e
ressonância magnética nuclear do hidrogênio (RMN H). O filtrado da suspensão da
repetição 4 foi analisado por ultravioleta (UV), IV, RMN 13C e RMN H, sendo
constatada a presença de lignina extracelular, com o maior teor sendo observado na
presença do e1icitor sacarose, seguido do ANA e AJ. As células em suspensão
apresentaram aumento no teor de lignina na parede celular em todos os tratamentos em
relação à testemunha e os maiores valores foram com o meio contendo sacarose. Foram
analisadas também as DHPs tendo como colchão o meio de cultura MS acrescido dos
mesmos elicitores testados na fase de suspensão celular. Para isto foram utilizados como
precursores os álcoois coniferílico ou sinapílico, H202 e peroxidase, com a lignina
analisada em RMN H e RMN 13e. Os resultados mostraram que houve síntese de DHPs
do álcool coniferílico (DHPlc, DHP2c e DHP4c) e do álcool sinapílico (DHP2s).
Porem quando se utilizou como precursor o álcool coniferílico não foram sintetizadas
DHPs no tratamento contendo sacarose como elicitor. E, quando foi utilizado como
precursor o álcool sinapílico, somente foram formadas DHPs na presença do elicitor
ANA. Concluiu-se, então, que a sacarose apresentou-se como um elicitor adequado para
a produção de lignina nas células em suspensão, tanto em nível celular quanto
extracelular. Entretanto, isto não foi observado em relação à produção de DHP. A
auxina ANA teve funcionalidade maior na formação de DHP2c e DHP2s. Estes
resultados devem ser considerados como um avanço nos estudos de lignificação com a
utilização de células em suspensão de E. urophylla. Quando esses questionamentos
forem identificados e solucionados será possível o desenvolvimento de novos
indivíduos desta espécie que conduzam à produção de produtos florestais de melhor
qualidade, com menor impacto ambiental nos processos industriais.

Palavras-Chave: | Células em suspensão; Lignina extracelular e Eucalyptus urophylla.
Thesagro: | Biotecnologia; Calogênese.
Categoria do assunto: | --
Registro original: | Embrapa Agroindústria Tropical (CNPAT)
Exemplares: | CNPAT - (11997-1) - UPA - TS - PP - 2009.00024 -  - 2009.00024 - DIS