Data/hora: 31/05/2024 15:07:52

Biblioteca(s): 	Embrapa Gado de Corte.	
Data corrente: 	14/02/2011	
Data da última atualização: 	14/02/2011	
Autoria: 	JANK, C.; ROSINHA, G. M. S.; FRAGOSO, S. P.; SANTOS, L. R.; SOARES, C. O.; ARAUJO, F. R.; ELISEI, C.	
Afiliação: 	CARINA CALIXTO, BOLSISTA CNPGC; GRACIA MARIA SOARES ROSINHA, CNPGC; UNIDERP; UNIDERP; CLEBER OLIVEIRA SOARES, CNPGC; FLABIO RIBEIRO ARAUJO, CNPGC; BOLSISTA CNPGC.	
Título: 	Mutação no gene wbkA de Brucella abortus inativa a expressão do antígeno-o do lipopolissacarídeo.	
Ano de publicação: 	2010	
Fonte/Imprenta: 	In: JORNADA CIENTÍFICA DA EMBRAPA GADO DE CORTE, 6., 2010, Campo Grande, MS. Ética na pesquisa científica: [Anais da ...]. Campo Grande, MS: Embrapa Gado de Corte, 2010. 1 CD-ROM. Coordenadora: Vanessa Felipe de Souza	
Páginas: 	1 p.	
Idioma: 	Português	
Conteúdo: 	Brucella abortus é o agente etiológico da brucelose bovina. A vacina S19 é a mais utilizada para o controle desta doença, no entanto, possui limitações, como a geração de diagnósticos falso-positivos. O antígeno-O do lipopolissacarídeo (LPS) bacteriano é o responsável por estes resultados, resultando que os animais não podem ser diferenciados entre vacinados ou contaminados no campo. Baseado na composição do LPS, Brucella spp. exibe dois fenótipos, liso e rugoso. A cepa rugosa não contém o antígeno-O de LPS. Devido à necessidade de desenvolver vacinas vivas rugosas de Brucella, o objetivo neste trabalho foi a obtenção e caracterização da cepa 2308?wbkA de B. abortus. Para tanto, por meio de técnicas moleculares, construiu-se o plasmídeo suicida pCI:wbkA:Cat que foi introduzido por eletroporação em B. abortus S2308. As cepas com mutação no gene wbkA foram, inicialmente, selecionadas por resistência/suscetibilidade a antibióticos e caracterizadas pela PCR. A caracterização para o fenótipo rugoso e liso foi realizada por Dot blot, utilizando-se o anticorpo monoclonal 2 A4 anti LPS de B. abortus. Três clones com o fenótipo cloranfenicol resistente (Catr) e ampicilina sensível (Amps) e, dois clones com o fenótipo cloranfenicol resistente (Catr) e ampicilina resistente (Ampr) foram confirmados pela PCR de acordo com o tamanho dos fragmentos amplificados. Os clones Catr e Amps são os de interesse, pois estes tiveram o knockout do gene wbkA, um dos responsáveis pela síntese do antígeno-O. Nas análises por Dot blot os clones de interesse não apresentaram coloração nas membranas, indicando fenótipo rugoso. Já os clones Catr e Ampr apresentaram coloração nas membranas, indicando o fenótipo liso. A obtenção da cepa 2308?wbkA é de grande importância para o desenvolvimento de vacinas contra a brucelose, pois esta será utilizada como controle em experimentos de análise de virulência e imunogenicidade contra a brucelose experimental.	
Thesagro: 	Brucella Abortus.	
Categoria do assunto: 	--	
Registro original: 	Embrapa Gado de Corte (CNPGC)	
Exemplares: 	CNPGC - (13709-1) - UPC - PL - DD - CD-142 - JOR -  - DIS