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Registro Completo |
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Biblioteca(s): |
Embrapa Soja. |
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Data corrente: |
22/12/2005 |
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Data da última atualização: |
22/12/2005 |
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Autoria: |
BINDE, D. R.; CHUEIRE, L. M. O.; LUCASI. H.; NICOLÁS, M. F.; VASCONCELOS, A. T. R.; GONZAGA, L. P.; SOUZA, R. C.; MARTINEZ-ROMERO, E.; FERNANDO GOMES BARCELLOS, F. G.; SILVA, M. F.; GARCIA, J. E.; HUNGRIA, H. |
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Título: |
Seqüenciamento do plasmídeo simbiótico da estirpe CFN 299 de Rhizobium tropici. |
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Ano de publicação: |
2005 |
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Fonte/Imprenta: |
In: SEMANA DE BIOTECNOLOGIA, 1., 2005, Londrina. [Resumos]. Londrina: UEL, 2005. |
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Descrição Física: |
1 CD-ROM. |
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Idioma: |
Português |
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Notas: |
Resumo - Pdf. 41. |
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Conteúdo: |
O objetivo desse trabalho foi seqüenciar parcialmente o plasmídeo simbiótico da estirpe
CFN 299 de Rhizobium tropici, que se associa simbioticamente ao feijoeiro ( Phaseolus
vulgaris), estabelecendo o processo de fixação biológica do nitrogênio. Inicialmente foram
construídas bibliotecas "shotgun" pela fragmentação do DNA ao acaso, por nebulização, obtendo fragmentos de 500 pares de bases (pb) a2 kb. Os fragmentos foram reparados e fosforilados por Klenow da DNA polimerase de Escherichia coli e separados em gel de agarose "low melting". A seguir, foram recuperados e ligados ao vetor pUC18, digerido com a enzima de restrição SmaI-BAP e defosforilados com a enzima T4 DNA ligase. Após a ligação, o material foi utilizado para transformação por eletroporação de células de E. coli estirpe DH10B. As células foram plaqueadas em meio contendo ampicilina, IPTG e X-gal e foram crescidas durante a noite, a 37° C. Colônias brancas individuais ( clones recombinantes) foram inoculadas em meio de cultura com ampicilina e crescidas, procedendo-se ao estoque a -80% e a novo crescimento, conforme descrito, para extração do DNA, realizado pelo método de rompimento alcalino. Após a precipitação, filtragem e verificação da concentração, o seqüenciamento foi realizado pelo método dos terminadores fluorescentes, em um seqüenciador automático MegaBACE ( Amersham Pharmacia Biotech). As leituras obtidas foram submetidas a análises de bioinformática. Até o presente momento foram construídas duas bibliotecas e foram realizadas 1.325 leituras, com o depósito de 1.220.032 pb. MenosO objetivo desse trabalho foi seqüenciar parcialmente o plasmídeo simbiótico da estirpe
CFN 299 de Rhizobium tropici, que se associa simbioticamente ao feijoeiro ( Phaseolus
vulgaris), estabelecendo o processo de fixação biológica do nitrogênio. Inicialmente foram
construídas bibliotecas "shotgun" pela fragmentação do DNA ao acaso, por nebulização, obtendo fragmentos de 500 pares de bases (pb) a2 kb. Os fragmentos foram reparados e fosforilados por Klenow da DNA polimerase de Escherichia coli e separados em gel de agarose "low melting". A seguir, foram recuperados e ligados ao vetor pUC18, digerido com a enzima de restrição SmaI-BAP e defosforilados com a enzima T4 DNA ligase. Após a ligação, o material foi utilizado para transformação por eletroporação de células de E. coli estirpe DH10B. As células foram plaqueadas em meio contendo ampicilina, IPTG e X-gal e foram crescidas durante a noite, a 37° C. Colônias brancas individuais ( clones recombinantes) foram inoculadas em meio de cultura com ampicilina e crescidas, procedendo-se ao estoque a -80% e a novo crescimento, conforme descrito, para extração do DNA, realizado pelo método de rompimento alcalino. Após a precipitação, filtragem e verificação da concentração, o seqüenciamento foi realizado pelo método dos terminadores fluorescentes, em um seqüenciador automático MegaBACE ( Amersham Pharmacia Biotech). As leituras obtidas foram submetidas a análises de bioinformática. Até o presente momento foram construídas duas biblio... Mostrar Tudo |
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Categoria do assunto: |
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Marc: |
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Registro original: |
Embrapa Soja (CNPSO) |
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| 2. |  | MELLADO, M.; LARA, L. M.; VELIZ, F. G.; SANTIAGO, M. A. de; AVENDAÑO-REYES, L.; MEZA-HERRERA, C.; GARCIA, J. E. Conception rate of artificially inseminated holstein cows affected by cloudy vaginal mucus, under intense heat conditions. Pesquisa Agropecuária Brasileira, Brasília, DF, v. 50, n. 6, p. 492-498, jun. 2015. Título em português: Taxa de concepção de vacas Holandesas inseminadas artificialmente e afetadas por muco vaginal turvo, sob condições de intenso calor.| Biblioteca(s): Embrapa Unidades Centrais. |
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| 3. | | ANDRADE, L. H. M.; LUGARINI, C.; OLIVEIRA, R. A. S.; SILVA, L. T. R.; MARVULO, M. F. V.; GARCIA, J. E.; DUBEY, J. P.; SILVA, J. C. R. Ocorrência de anticorpos anti-Toxoplasma gondii em aves silvestres de três Unidades de Conservação Federais da Paraíba e da Bahia. Pesquisa Veterinária Brasileira,Rio de Janeiro, v. 36, n. 2, p. 103-107, fev. 2016.| Biblioteca(s): Embrapa Unidades Centrais. |
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| 4. | | LIMA JUNIOR, N. B.; ARANDAS, M. J. G.; SILVA, F. R.; ANTONIO, E. A.; AGUIAR JÚNIOR, F. C. A.; TEIXEIRA, A. A. C.; GARCIA, J. E.; SANTOS, K. R. P. Analysis of the reproductive stage and ovarian histomorphometry of Dermanura cinerea (Chiroptera: Phyllostomidae) in an Atlantic Forest fragment of Pernambuco, northeastern Brazil. Pesquisa Veterinária Brasileira, Rio de Janeiro, v. 38, n. 1, p. 164-174, janeiro 2018 Título em português: Análise do estágio reprodutivo e histomorfometria ovariana de Dermanura cinerea (Chiroptera: Phyllostomidae) em um fragmento de Mata Atlântica de Pernambuco, Nordeste do Brasil.| Biblioteca(s): Embrapa Unidades Centrais. |
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| 5. | | BINDE, D. R.; CHUEIRE, L. M. de O.; LUCAS, I. H.; NICOLÁS, M. F.; VASCONCELOS, A. T. R.; GONZAGA, L. de P.; MARTINEZ-ROMERO, E.; BARCELLOS, F. G.; SILVA, M. F. da; GARCIA, J. E.; HUNGRIA, M. Sequenciamento do plasmídeo simbiótico da estirpe CFN 299 de Rhizobium tropici. In: JORNADA ACADÊMICA DA EMBRAPA SOJA, 2005, Londrina. Resumos expandidos. Londrina: Embrapa Soja, 2005. p. 29-34. (Embrapa Soja. Documentos, 268).| Tipo: Artigo em Anais de Congresso |
| Biblioteca(s): Embrapa Soja. |
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| 6. | | BINDE, D. R.; CHUEIRE, L. M. O.; LUCASI. H.; NICOLÁS, M. F.; VASCONCELOS, A. T. R.; GONZAGA, L. P.; SOUZA, R. C.; MARTINEZ-ROMERO, E.; FERNANDO GOMES BARCELLOS, F. G.; SILVA, M. F.; GARCIA, J. E.; HUNGRIA, H. Seqüenciamento do plasmídeo simbiótico da estirpe CFN 299 de Rhizobium tropici. In: SEMANA DE BIOTECNOLOGIA, 1., 2005, Londrina. [Resumos]. Londrina: UEL, 2005. 1 CD-ROM. Resumo - Pdf. 41.| Biblioteca(s): Embrapa Soja. |
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