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Registro Completo |
Biblioteca(s): |
Embrapa Gado de Leite. |
Data corrente: |
14/01/2020 |
Data da última atualização: |
06/02/2024 |
Tipo da produção científica: |
Artigo em Periódico Indexado |
Autoria: |
FREITAS, V. J. F.; CAMPELO, I. S.; SILVA, M. M. A. S.; CAVALCANTI, C. M.; TEIXEIRA, D. I. A.; CAMARGO, L. S. de A.; MELO L. M.; RÁDIS-BAPTISTA, G. |
Afiliação: |
Vicente J. F. Freitas; Iana S. Campelo; Mirelly M .A. S. Silva; Camila M. Cavalcanti; Dárcio I. A. Teixeira; LUIZ SERGIO DE ALMEIDA CAMARGO, CNPGL; Luciana M. Melo; Gandhi Rádis-Baptista. |
Título: |
Disulphide-less crotamine is effective for formation of DNA-peptide complex but is unable to improve bovine embryo transfection. |
Ano de publicação: |
2020 |
Fonte/Imprenta: |
Zygote, v. 28, n. 1, p. 72-79, 2020. |
DOI: |
https://doi.org/10.1017/s0967199419000716 |
Idioma: |
Inglês |
Conteúdo: |
This study aimed to investigate the ability of disulphide-less crotamine (dLCr) to complex DNA and to evaluate whether the DNA-dLCr complex is capable of improving transfection in bovine embryos. Three experiments were performed to: (i) evaluate the formation and stability of the DNA-dLCr complex; (ii) assess the dLCr embryotoxicity by exposure of bovine embryos to dLCr; and (iii) assess the efficiency of bovine embryo transfection after microinjection of the DNA-dLCr complex or green fluorescent protein (GFP) plasmid alone (control). DNA complexation by dLCr after 30 min of incubation at 1:100 and 1:50 proportions presented higher efficiency (P < 0.05) than the two controls: native crotamine (NCr) 1:10 and lipofectamine. There was no difference between DNA-dLCr 1:25 and the controls. The DNA-dLCr complexation was evaluated at different proportions and times. In all, at least half of maximum complexation was achieved within the initial 30 min. No embryotoxicity of dLCr was verified after exposure of in vitro fertilized embryos to different concentrations of the peptide. The effectiveness of dLCr to improve exogenous gene expression was evaluated by microinjection of the DNA-dLCr complex into in vitro fertilized zygotes, followed by verification of both embryo development and GFP expression. From embryos microinjected with DNA only, 4.6% and 2.8% expressed the GFP transgene at day 5 and day 7, respectively. The DNA-dLCr complex did not increase the number of GFP-positive embryos. In conclusion, dLCr forms a complex with DNA and its application in in vitro culture is possible. However, the dLCr peptide sequence should be redesigned to improve GFP expression. MenosThis study aimed to investigate the ability of disulphide-less crotamine (dLCr) to complex DNA and to evaluate whether the DNA-dLCr complex is capable of improving transfection in bovine embryos. Three experiments were performed to: (i) evaluate the formation and stability of the DNA-dLCr complex; (ii) assess the dLCr embryotoxicity by exposure of bovine embryos to dLCr; and (iii) assess the efficiency of bovine embryo transfection after microinjection of the DNA-dLCr complex or green fluorescent protein (GFP) plasmid alone (control). DNA complexation by dLCr after 30 min of incubation at 1:100 and 1:50 proportions presented higher efficiency (P < 0.05) than the two controls: native crotamine (NCr) 1:10 and lipofectamine. There was no difference between DNA-dLCr 1:25 and the controls. The DNA-dLCr complexation was evaluated at different proportions and times. In all, at least half of maximum complexation was achieved within the initial 30 min. No embryotoxicity of dLCr was verified after exposure of in vitro fertilized embryos to different concentrations of the peptide. The effectiveness of dLCr to improve exogenous gene expression was evaluated by microinjection of the DNA-dLCr complex into in vitro fertilized zygotes, followed by verification of both embryo development and GFP expression. From embryos microinjected with DNA only, 4.6% and 2.8% expressed the GFP transgene at day 5 and day 7, respectively. The DNA-dLCr complex did not increase the number of GFP-positive embr... Mostrar Tudo |
Palavras-Chave: |
Gene delivery; Microinjection; Nucleic acid-peptide complex. |
Thesaurus Nal: |
Embryotoxicity; Transgenesis. |
Categoria do assunto: |
-- |
Marc: |
LEADER 02565naa a2200277 a 4500 001 2118715 005 2024-02-06 008 2020 bl uuuu u00u1 u #d 024 7 $ahttps://doi.org/10.1017/s0967199419000716$2DOI 100 1 $aFREITAS, V. J. F. 245 $aDisulphide-less crotamine is effective for formation of DNA-peptide complex but is unable to improve bovine embryo transfection.$h[electronic resource] 260 $c2020 520 $aThis study aimed to investigate the ability of disulphide-less crotamine (dLCr) to complex DNA and to evaluate whether the DNA-dLCr complex is capable of improving transfection in bovine embryos. Three experiments were performed to: (i) evaluate the formation and stability of the DNA-dLCr complex; (ii) assess the dLCr embryotoxicity by exposure of bovine embryos to dLCr; and (iii) assess the efficiency of bovine embryo transfection after microinjection of the DNA-dLCr complex or green fluorescent protein (GFP) plasmid alone (control). DNA complexation by dLCr after 30 min of incubation at 1:100 and 1:50 proportions presented higher efficiency (P < 0.05) than the two controls: native crotamine (NCr) 1:10 and lipofectamine. There was no difference between DNA-dLCr 1:25 and the controls. The DNA-dLCr complexation was evaluated at different proportions and times. In all, at least half of maximum complexation was achieved within the initial 30 min. No embryotoxicity of dLCr was verified after exposure of in vitro fertilized embryos to different concentrations of the peptide. The effectiveness of dLCr to improve exogenous gene expression was evaluated by microinjection of the DNA-dLCr complex into in vitro fertilized zygotes, followed by verification of both embryo development and GFP expression. From embryos microinjected with DNA only, 4.6% and 2.8% expressed the GFP transgene at day 5 and day 7, respectively. The DNA-dLCr complex did not increase the number of GFP-positive embryos. In conclusion, dLCr forms a complex with DNA and its application in in vitro culture is possible. However, the dLCr peptide sequence should be redesigned to improve GFP expression. 650 $aEmbryotoxicity 650 $aTransgenesis 653 $aGene delivery 653 $aMicroinjection 653 $aNucleic acid-peptide complex 700 1 $aCAMPELO, I. S. 700 1 $aSILVA, M. M. A. S. 700 1 $aCAVALCANTI, C. M. 700 1 $aTEIXEIRA, D. I. A. 700 1 $aCAMARGO, L. S. de A. 700 1 $aMELO L. M. 700 1 $aRÁDIS-BAPTISTA, G. 773 $tZygote$gv. 28, n. 1, p. 72-79, 2020.
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Registro original: |
Embrapa Gado de Leite (CNPGL) |
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Biblioteca |
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Origem |
Tipo/Formato |
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Cutter |
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Volume |
Status |
URL |
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Registro Completo
Biblioteca(s): |
Embrapa Meio Ambiente. |
Data corrente: |
14/04/2016 |
Data da última atualização: |
14/04/2016 |
Tipo da produção científica: |
Orientação de Tese de Pós-Graduação |
Autoria: |
NASCIMENTO M. dos S. |
Afiliação: |
MARCELO DOS SANTOS NASCIMENTO, Universidade Federal de Mato Grosso do Sul. |
Título: |
Ácido cítrico em rações para juvenis de pacu (Piaractus mesopotamicus). |
Ano de publicação: |
2015 |
Fonte/Imprenta: |
2015. |
Páginas: |
51 f. |
Idioma: |
Português |
Notas: |
Dissertação (Mestrado em Zootecnia) - Universidade Estadual de Mato Grosso do Sul, Aquidauana.
Orientador: Hamilton Hisano (CNPMA). |
Conteúdo: |
Resumo: Os ácidos orgânicos são aditivos que podem melhorar a disponibilidade de nutrientes e absorção de minerais das rações, e consequentemente, o desempenho de peixes. Desta forma, a presente pesquisa teve como objetivo avaliar diferentes níveis de ácido cítrico em rações para juvenis de pacu. Para o ensaio de desempenho foram formuladas quatro rações isoproteicas (23% de proteína digestível) e isoenergéticas (3.200 kcal de energia digestível/kg), com quatro níveis de ácido cítrico (0,0; 1,0; 2,0 e 3,0%). Foram utilizados 160 animais com peso médio de 12,73±1,10 g, distribuídos em 16 aquários (300 L) em sistema de recirculação de água, em delineamento experimental inteiramente casualizado, com quatro tratamentos e quatro repetições. O período experimental teve duração de 90 dias. Para o ensaio de digestibilidade, as rações foram acrescidas com 0,1% do óxido crômico III (Cr2O3). Foram utilizados 96 animais com peso de 80,35 ± 5,12 g, distribuídos em oito gaiolas com volume de 80 L alojadas em dois tanques (2.000 L). A alimentação foi fornecida a vontade das 8h00 ás 16h30. As fezes foram coletadas em aquários de fundo cônico (200 L). Não foram observadas diferenças (P>0,05) para os parâmetros de desempenho, hematológicos, pH estomacal e intestinal, índices somáticos, composição corporal e na digestibilidade aparente dos nutrientes e minerais das rações. Por outro lado, animais alimentados com 3% de ácido cítrico apresentaram respostas superiores para ganho de peso (7,41%), taxa de crescimento especifico (7,35%), taxa de eficiência protéica (4,06%), digestibilidade da matéria seca (4,37%) e disponibilidade do fósforo (10,90%) e cálcio (4,54%), quando comparado ao controle (sem suplementação de ácido cítrico). MenosResumo: Os ácidos orgânicos são aditivos que podem melhorar a disponibilidade de nutrientes e absorção de minerais das rações, e consequentemente, o desempenho de peixes. Desta forma, a presente pesquisa teve como objetivo avaliar diferentes níveis de ácido cítrico em rações para juvenis de pacu. Para o ensaio de desempenho foram formuladas quatro rações isoproteicas (23% de proteína digestível) e isoenergéticas (3.200 kcal de energia digestível/kg), com quatro níveis de ácido cítrico (0,0; 1,0; 2,0 e 3,0%). Foram utilizados 160 animais com peso médio de 12,73±1,10 g, distribuídos em 16 aquários (300 L) em sistema de recirculação de água, em delineamento experimental inteiramente casualizado, com quatro tratamentos e quatro repetições. O período experimental teve duração de 90 dias. Para o ensaio de digestibilidade, as rações foram acrescidas com 0,1% do óxido crômico III (Cr2O3). Foram utilizados 96 animais com peso de 80,35 ± 5,12 g, distribuídos em oito gaiolas com volume de 80 L alojadas em dois tanques (2.000 L). A alimentação foi fornecida a vontade das 8h00 ás 16h30. As fezes foram coletadas em aquários de fundo cônico (200 L). Não foram observadas diferenças (P>0,05) para os parâmetros de desempenho, hematológicos, pH estomacal e intestinal, índices somáticos, composição corporal e na digestibilidade aparente dos nutrientes e minerais das rações. Por outro lado, animais alimentados com 3% de ácido cítrico apresentaram respostas superiores para ganho de peso (7,41%), ... Mostrar Tudo |
Palavras-Chave: |
Ácidos orgânicos; Desempenho. |
Thesagro: |
Ácido cítrico; Alimentação suplementar; Nutrição animal; Pacu. |
Thesaurus NAL: |
Citric acid; Fish nutrition; Piaractus mesopotamicus. |
Categoria do assunto: |
L Ciência Animal e Produtos de Origem Animal |
URL: |
https://ainfo.cnptia.embrapa.br/digital/bitstream/item/142317/1/2015TS10.pdf
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Marc: |
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Registro original: |
Embrapa Meio Ambiente (CNPMA) |
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