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Registro Completo |
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Biblioteca(s): |
Embrapa Pecuária Sul. |
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Data corrente: |
26/01/2017 |
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Data da última atualização: |
26/01/2017 |
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Tipo da produção científica: |
Artigo em Periódico Indexado |
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Autoria: |
GASPAR, E. B.; BATISTA, M. F.; RAMOS, J. V.; RIZZARDO, J. S.; DOMINGUES, R.; GULIAS-GOMES, C. C. |
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Afiliação: |
EMANUELLE BALDO GASPAR, CPPSUL; Mariana Feijó Batista; Jeferson Vidart Ramos; Juliana Soares Rizzardo; ROBERT DOMINGUES, CPPSUL; CLAUDIA CRISTINA GULIAS GOMES, CPPSUL. |
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Título: |
Padronização de ensaio imunoadsorvente ligado a enzima (ELISA) para detecção de IgG total, IgG1 e IgG2 contra antígenos de larvas, intestino e glândulas salivares de Rhipicephalus (Boophilus) microplus. |
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Ano de publicação: |
2016 |
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Fonte/Imprenta: |
Revista Congrega Urcamp, Bagé, v. 13, 2016. |
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Idioma: |
Português |
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Notas: |
Revista da Jornada de Pós-Graduação e Pesquisa - Congrega Urcamp. Autoria consta no resumo da publicação. |
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Conteúdo: |
PADRONIZAÇÃO DE ENSAIO IMUNOADSORVENTE LIGADO A ENZIMA (ELISA) PARA DETECÇÃO DE IgG total, IgG1 e IgG2 CONTRA ANTÍGENOS DE LARVAS, INTESTINO E GLÂNDULAS SALIVARES DE Rhipicephalus (Boophilus) microplus Emanuelle Baldo Gaspar, Mariana Feijó Batista, Jeferson Vidart Ramos, Juliana Soares Rizzardo, Robert Domingues, Claudia Cristina Gulias Gomes Resumo I ? Introdução e justificativa: O ensaio imunoadsorvente ligado à enzima, ELISA, permite a detecção/quantificação da concentração de antígenos ou anticorpos. Dentre outras aplicações, este teste pode ser padronizado para detecção de anticorpos produzidos em resposta a antígenos de ectoparasitas. II ? Objetivo: O objetivo deste trabalho foi padronizar novos testes de ELISA para avaliar a imunidade humoral ao Rhipicephalus microplus, pela mensuração de IgG total, e das subclasses IgG1 e IgG2 em soro de bovinos. III ? Metodologia: Como antígenos, foram utilizados extratos solúveis de larvas (EL), e de intestinos (EI) ou glândula salivar (EGS) de adultos jovens do carrapato R. microplus, os quais foram adsorvidos a placas de 96 poços. A padronização de cada teste foi feita com a utilização de duas placas, uma controle negativo (soros pré-imune) e outra positivo (soros de bovinos coletados após sucessivas infestações artificiais com carrapato). Nas placas, os ensaios foram feitos por titulação cruzada, com diluições seriadas, tanto do antígeno, quanto do soro teste. Alguns parâmetros foram padronizados em todos os testes: diluição do antígeno em tampão carbonato-bicarbonato; Bloqueio com PBS + polisorbato 20 0,05% + leite desnatado 5%; Diluição das pastilhas de revelador conforme instrução do fabricante (SigmaFast OPD®); Parada das reações com H2SO4 3M; Duração de 1 hora e temperatura de 37°C para todas incubações, exceto para o OPD, que foi de 15 minutos a temperatura ambiente; Leitura das amostras em leitor de microplacas a 492 nm. IV ? Resultados: Para a escolha das concentrações ideais de antígeno e soro teste a serem utilizadas, os antígenos (EL, EGS ou EI) foram diluídos na base dois, partindo de uma concentração inicial de 1,5 mg/mL, em 11 diluições seriadas, nos seguintes intervalos: EL: 1/25 a 1/25600; EGS: 1/50 a 1/51200; EI: 1/25 a 1/25600, para a padronização do ELISA para detecção de IgG total; EL: 1/12,5 a 1/12800; EGS: 1/50 a 1/51200; EI: 1/12,5 a 1/12800, para a padronização do ELISA para detecção de IgG1; EL: 1/12,5 a 1/12800; EGS: 1/12,5 a 1/12800; EI: 1/12,5 a 1/12800, para a padronização do ELISA para detecção de IgG2. Já o soro teste foi diluído na base dois, em oito diluições seriadas, nos seguintes intervalos: ELISA para detecção de IgG total: 1/50 a 1/3200. Detecção de IgG1: placas adsorvidas com EL e EI: soro diluído 1/12,5 a 1/800; placas adsorvidas com EGS: soro diluído 1/50 a 1/3200; Detecção de IgG2: soro diluído 1/12,5 a 1/800; Com os resultados da leitura foram confeccionados gráficos expressando as curvas de absorbância. A análise destas curvas e da razão entre absorbância no soro positivo/negativo permitiu a escolha das diluições dos extratos [antígeno (Ag)] e soro teste: ELISA para detecção de IgG total (conjugado 1/10.000 em todos): EL: Ag 1/200; Soro: 1/200; EGS: Ag 1/100; Soro 1/200; EI: Ag 1/800; soro 1/100. ELISA para detecção de IgG1 (conjugado 1/20.000 em todos): EL: Ag 1/25; Soro: 1/50; EGS: Ag 1/100; Soro 1/200; EI: Ag 1/25; soro 1/50. ELISA para detecção de IgG2 (conjugado 1/10.000 em todos): EL: Ag 1/50; Soro: 1/50; EGS: Ag 1/100; Soro 1/50; EI: Ag 1/12,5; soro 1/100. V ? Conclusão: Os testes de ELISA padronizados mostraram-se factíveis e de fácil execução, permitindo futuras avaliações de desenvolvimento e caracterização de resposta imune ao carrapato, em bovinos de diferentes raças e em indivíduos com diferentes graus de suscetibilidade ao carrapato. MenosPADRONIZAÇÃO DE ENSAIO IMUNOADSORVENTE LIGADO A ENZIMA (ELISA) PARA DETECÇÃO DE IgG total, IgG1 e IgG2 CONTRA ANTÍGENOS DE LARVAS, INTESTINO E GLÂNDULAS SALIVARES DE Rhipicephalus (Boophilus) microplus Emanuelle Baldo Gaspar, Mariana Feijó Batista, Jeferson Vidart Ramos, Juliana Soares Rizzardo, Robert Domingues, Claudia Cristina Gulias Gomes Resumo I ? Introdução e justificativa: O ensaio imunoadsorvente ligado à enzima, ELISA, permite a detecção/quantificação da concentração de antígenos ou anticorpos. Dentre outras aplicações, este teste pode ser padronizado para detecção de anticorpos produzidos em resposta a antígenos de ectoparasitas. II ? Objetivo: O objetivo deste trabalho foi padronizar novos testes de ELISA para avaliar a imunidade humoral ao Rhipicephalus microplus, pela mensuração de IgG total, e das subclasses IgG1 e IgG2 em soro de bovinos. III ? Metodologia: Como antígenos, foram utilizados extratos solúveis de larvas (EL), e de intestinos (EI) ou glândula salivar (EGS) de adultos jovens do carrapato R. microplus, os quais foram adsorvidos a placas de 96 poços. A padronização de cada teste foi feita com a utilização de duas placas, uma controle negativo (soros pré-imune) e outra positivo (soros de bovinos coletados após sucessivas infestações artificiais com carrapato). Nas placas, os ensaios foram feitos por titulação cruzada, com diluições seriadas, tanto do antígeno, quanto do soro teste. Alguns parâmetros foram padronizados em todos os testes: diluição do ... Mostrar Tudo |
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Thesagro: |
Antígeno; Carrapato; Técnica imunoenzimática. |
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Categoria do assunto: |
-- |
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URL: |
https://ainfo.cnptia.embrapa.br/digital/bitstream/item/154022/1/1068-3376-1-PB.pdf
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Marc: |
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773 $tRevista Congrega Urcamp, Bagé$gv. 13, 2016.
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Registro original: |
Embrapa Pecuária Sul (CPPSUL) |
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| Registros recuperados : 155 | |
| 81. |  | SANTOS, P. A. dos; JANOVIK, N.; DOMINGUES, R.; FRANCK, B. M.; CASANOVA, V. P.; LEAL, M. L. do R.; MINHO, A. P. Avaliação in vivo da atividade anti-helmíntica do extrato de Senecio brasiliensis e de Acacia mearnsii em ovinos experimentalmente infectados. In: CONGRESSO BRASILEIRO DE ZOOTECNIA, 26., 2016, Santa Maria. Cinquenta anos de zootecnia no Brasil: anais. Santa Maria: Sociedade Brasileira de Zootecnia, 2016. Zootec.| Tipo: Artigo em Anais de Congresso |
| Biblioteca(s): Embrapa Pecuária Sul. |
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| 82. | | SANTOS, P. A. dos; JANOVIK, N.; DOMINGUES, R.; FRANCK, B. M.; CASANOVA, V. P.; LEAL, M. L. do R.; MINHO, A. P. Avaliação in vivo da atividade antihelmíntica de Senecio brasiliensis e de Acacia mearnsii em ovinos experimentalmente infectados. In: SIMPÓSIO DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA DA EMBRAPA PECUÁRIA SUL, 6., 2016, Bagé. Resumos... Bagé: Embrapa Pecuária Sul, 2016. p. 19. Claudia Cristina Gulias Gomes, editora técnica.| Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
| Biblioteca(s): Embrapa Pecuária Sul. |
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| 83. | | SANTOS, P. A. dos; MAGALHÃES, C. B.; DOMINGUES, R.; MINHO, A. P.; GASPAR, E. B.; SUÑÉ, R. W.; ALVES, T. C.; CHAGAS, A. C. de S. Avaliação de tratamentos alternativos para controle de diarreia em bezerros leiteiros. In: CONGRESSO INTERNACIONAL DO LEITE, 13.; WORKSHOP DE POLÍTICAS PÚBLICAS, 13.; SIMPÓSIO DE SUSTENTABILIDADE DA ATIVIDADE LEITEIRA, 14., 2015, Porto Alegre. Anais... Brasília, DF: Embrapa, 2015. 1 CD-ROM. (Embrapa Gado de Leite. Documentos, 184.). Editores Técnicos: Paulo do Carmo Martins, Gilberto Antônio Piccinini, Ernesto Ênio Budke Krug, Marne Sidney de Paula Moreira, Carlos Eugênio Martins, Oreno Ardêmio Heineck, Marcelo Henrique Otenio, Leonardo Dornelles de Dorneles,...| Tipo: Artigo em Anais de Congresso |
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| 84. | | SANTOS, P. A. dos; MAGALHÃES, C. B.; DOMINGUES, R.; MINHO, A. P.; GASPAR, E. B.; SUÑÉ, R. W.; ALVES, T. C.; CHAGAS, A. C. de S. Avaliação de tratamentos alternativos para controle de diarreia em bezerros leiteiros. In: SIMPÓSIO DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA DA EMBRAPA PECUÁRIA SUL, 5., 2015, Bagé. Resumos dos trabalhos... Bagé: Embrapa Pecuária Sul, 2015. p. 18. Editora técnica Claudia Cristina Gulias Gomes.| Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
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| 85. | | BERNE, N.; MOURA, M. Q.; GASPAR, E. B.; MINHO, A. P.; DOMINGUES, R.; SANTOS, P. A.; COSTA, C. M.; LEIVAS LEITE, F. P. Avaliação da resposta imune de ovinos infectados com Haemunchus contortus. In: CONGRESSO BRASILEIRO DE PARASITOLOGIA VETERINÁRIA, 20., 2018, Londrina, PR. Anais... Londrina, PR: CBPV; UEL, 2018. p.321. 17 a 19 de setembro de 2018.| Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
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| 86. | | CARVALHO, W. A.; DOMINGUES, R.; PRATA, M. C. de A.; SILVA, M. V. G. B.; GUIMARÃES, S. E. F.; MACHADO, M. A. Microarray analysis of tick-infested skin in resistant and susceptible cattle confirms the role of inflammatory pathways in immune activation and larval rejection. Veterinary Parasitology, Amsterdam, v. 205, n. 1?2, p. 307?317, Sept. 2014.| Tipo: Artigo em Periódico Indexado | Circulação/Nível: A - 1 |
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| 92. | | ZAFALON, L. F.; MINHO, A. P.; GASPAR, E. B.; SUÑÉ, R. W.; DOMINGUES, R.; CARACUSCHANSKI, F. D.; ALVES, T. C.; BARIONI JUNIOR, W. Evaluation of homeopathic protocols for the treatment of subclinical mastitis in lactating cows. International Journal of High Dilution Research, v. 22, p. 105-114, 2022.| Tipo: Artigo em Periódico Indexado | Circulação/Nível: B - 3 |
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| 94. | | LANGE, C. C.; BRITO, M. A. V. P. e; SILVA, F. S. DA; ALVIM, M. C. T.; REIS, D. R. L.; DOMINGUES, R. Identificação de estafilococos coagulase negativos isolados de mastite bovina por sequenciamento do rDNA 16S. In: Workshop de Iniciação Científica da Embrapa Gado de Leite, 8., 2011, Juiz de Fora. Anais... Documentos, 151| Tipo: Artigo em Anais de Congresso |
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| 95. | | LANGE, C. C.; BRITO, M. A. V. P. e; SILVA, F. S. DA; ALVIM, M. C. T.; REIS, D. R. de L.; DOMINGUES, R. Identificação de estafilococos coagulase negativos isolados mastite bovina por sequenciamento do rDNA 16S. In: CONGRESSO BRASILEIRO DE MICROBIOLOGIA, 26., 2011, Foz do Iguaçú. Resumos... Foz do Iguaçú: SBM, 2011.| Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
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| 96. | | LANGE, C. C.; BRITO, M. A. V. P. e; SILVA, F. S.; ALVIM, M. C. T.; REIS, D. L. R.; DOMINGUES, R. Identification of coagulase negative Staphylococci isolated from bovine mastitis by 16S rDNA sequence DNA. In: Simpósio Embrapa LabEx EUA de Sanidade Animal, 2., 2012, Brasília. Proceedings... Brasília: Embrapa Estudos e Capacitação, 2012 p. 12| Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
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| 97. | | LANGE, C. C.; BRITO, M. A. V. P. e; SILVA, F. S.; ALVIM, M. C. T.; REIS, D. R. de L.; DOMINGUES, R. Identification of coagulase negative staphylococci isolated from bovine mastitis by 16S rDNA sequencing. In: Simpósio Embrapa LabEx EUA de Sanidade Animal, 2., 2012, Brasília. Proceedings... Brasília: Embrapa Estudos e Capacitação, 2012 p. 13| Tipo: Artigo em Anais de Congresso |
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| 98. | | FARIAS, J. A.; GULIAS GOMES, C. C.; MINHO, A. P.; DOMINGUES, R.; FRANCK, B. M.; GRANADA, R. L.; SOUZA, A. P. de. Sensibilidade de larvas e teleóginas de Riphicephalus (Boophilus) microplus ao polissorbato 80. In: CONGRESSO BRASILEIRO DE PARASITOLOGIA VETERINÁRIA, 18., 2014, Gramado. Fronteiras da Parasitologia. Porto Alegre: UFRGS, 2014.| Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
| Biblioteca(s): Embrapa Pecuária Sul. |
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| 100. | | MAZZOCCOLI, L.; CARDOSO, SILVIA H.; AMARANTE, G. W.; SOUZA, M. V. N. DE; DOMINGUES, R.; MACHADO, M. A.; ALMEIDA, M. V. DE; TEIXEIRA, H. C. Novel thalidomide analogues from diamines inhibit pro-inflammatory cytokine production and CD80 expression while enhancing IL-10. Biomedicine & Pharmacotherapy, v. 66, p. 323-329, 2012. Não consta da meta de 2012.| Tipo: Artigo em Periódico Indexado | Circulação/Nível: A - 2 |
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