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 | Acesso ao texto completo restrito à biblioteca da Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia. Para informações adicionais entre em contato com cenargen.biblioteca@embrapa.br. |
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Registro Completo |
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Biblioteca(s): |
Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia. |
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Data corrente: |
04/10/2006 |
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Data da última atualização: |
21/12/2023 |
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Tipo da produção científica: |
Orientação de Tese de Pós-Graduação |
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Autoria: |
CORRÊA, G. A. |
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Título: |
Tensão de oxigênio durante o cultivo in vitro de embriões bovinos: efeito na produção e expressão de genes relacionados ao estresse oxidativo. |
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Ano de publicação: |
2006 |
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Fonte/Imprenta: |
2006. |
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Páginas: |
61 f. |
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Idioma: |
Português |
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Notas: |
Dissertação (Mestrado em Ciências Agrárias) - Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Brasília. Orientador: Rodolfo Rumpf, Co-Orientadora: Margot Alves Nunes Dode. |
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Conteúdo: |
Apesar dos avanços obtidos nos últimos anos nas técnicas de maturação, fecundação e cultivo in vitro de embriões bovinos, a qualidade dos embriões produzidos in vitro ainda é inferior a dos in vivo. O ambiente de cultivo após a fecundação é considerado responsável pela qualidade dos embriões. Dentre os fatores que podem influenciar o ambiente de cultivo, o estresse oxidativo causado pela alta tensão de O2 tem recebido especial atenção. Atualmente, a maioria dos sistemas de cultivo utilizada para a PIV usa o meio SOFaaci com atmosfera de 5% de 02. Portanto, o presente estudo teve por objetivo comparar a produção de embriões em sistema de cultivo com alta e baixa tensão de 02. Um total de 1118 ovócitos obtidos de ovários de abatedouro foram maturados e fecundados in vitro. Vinte horas após a inseminação (pi) os zigotos foram separados em 2 grupos. No primeiro grupo (T1) os zigotos foram lavados e transferidos para o meio de cultivo SOFaaci e cultivados por 7 dias em atmosfera de 5% CO2 em ar, à 39°C. No outro grupo (T2), os zigotos foram desnudados por pipetagens sucessivas, e transferidos para o meio SOFaaci, onde foram cultivados em atmosfera de 5% CO2 e 5% de 02, a 39°C. As taxas de clivagem foram avaliadas 48 horas pi e as de blastocisto em 06 e 07 pio De ambos os grupos, um total de 94 embriões no estágio de blastocisto expandido em 07 foram fixados e corados com aceto-orceína para contagem do número de células, e 7 "pools" com 15 embriões de cada tratamento, foram congelados para avaliação da expressão de genes relacionados ao estresse oxidativo, sendo superóxido dismutase (Mn-SOO), catalase e glutationa peroxidase (GPX4). Os dados relativos à taxa de clivagem e blastocisto foram analisados pelo teste do Chi-quadrado, os de número de células pela análise de variância e os relativos à expressão gênica, pelo teste t de Student ou teste de Mann-Whitney. A taxa de clivagem foi semelhante (P>0,05) para os grupos sendo 77,4% para o T1 e 79,9% para o T2. A taxa de blastocisto em D6 foi maior (P<0,05) no grupo cultivado em baixa tensão de O2 (40,7%) do que no de alta tensão (33,8%). Entretanto, a taxa de blastocisto em D7 foi similar (P>0,05) para os dois grupos, sendo 44,7% e 47,1% para T1 e T2, respectivamente. O número total de células (T1 = 175,6:t54,1; T2= 160,6:t41,8) dos embriões, não variou (P>0,05) entre os dois sistemas de cultivo. A quantidade relativa de transcritos para o gene Mn-SOD foi maior (P<0,05) na presença de alto O2, para a catalase e a GPX4 o nível de expressão foi semelhante nos dois sistemas de cultivo. Esses resultados sugerem que o cultivo de embriões bovinos em meio SOFaaci sob alta tensão de 02 na presença de células do cumulus não afeta a quantidade e qualidade dos embriões produzidos in vitro. É possível que as células do cumulus tenham um papel importante na retirada de substâncias indesejáveis minimizando 9 estresse oxidativo causado pela alta tensão de O2. MenosApesar dos avanços obtidos nos últimos anos nas técnicas de maturação, fecundação e cultivo in vitro de embriões bovinos, a qualidade dos embriões produzidos in vitro ainda é inferior a dos in vivo. O ambiente de cultivo após a fecundação é considerado responsável pela qualidade dos embriões. Dentre os fatores que podem influenciar o ambiente de cultivo, o estresse oxidativo causado pela alta tensão de O2 tem recebido especial atenção. Atualmente, a maioria dos sistemas de cultivo utilizada para a PIV usa o meio SOFaaci com atmosfera de 5% de 02. Portanto, o presente estudo teve por objetivo comparar a produção de embriões em sistema de cultivo com alta e baixa tensão de 02. Um total de 1118 ovócitos obtidos de ovários de abatedouro foram maturados e fecundados in vitro. Vinte horas após a inseminação (pi) os zigotos foram separados em 2 grupos. No primeiro grupo (T1) os zigotos foram lavados e transferidos para o meio de cultivo SOFaaci e cultivados por 7 dias em atmosfera de 5% CO2 em ar, à 39°C. No outro grupo (T2), os zigotos foram desnudados por pipetagens sucessivas, e transferidos para o meio SOFaaci, onde foram cultivados em atmosfera de 5% CO2 e 5% de 02, a 39°C. As taxas de clivagem foram avaliadas 48 horas pi e as de blastocisto em 06 e 07 pio De ambos os grupos, um total de 94 embriões no estágio de blastocisto expandido em 07 foram fixados e corados com aceto-orceína para contagem do número de células, e 7 "pools" com 15 embriões de cada tratamento, foram congel... Mostrar Tudo |
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Palavras-Chave: |
Embriões; Estresse oxidativo; Tensão de oxigênio. |
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Thesagro: |
Bovino. |
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Categoria do assunto: |
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Registro original: |
Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia (CENARGEN) |
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Biblioteca |
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Classificação |
Cutter |
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Volume |
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| Acesso ao texto completo restrito à biblioteca da Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia. Para informações adicionais entre em contato com cenargen.biblioteca@embrapa.br. |
Registro Completo
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Biblioteca(s): |
Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia. |
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Data corrente: |
10/02/2012 |
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Data da última atualização: |
27/02/2023 |
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Tipo da produção científica: |
Resumo em Anais de Congresso |
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Autoria: |
ABREU, E. F. M.; ANDRADE, E. C. de; ARAGAO, F. J. L. |
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Afiliação: |
Emanuel Felipe Medereiros Abreu, UnB; EDUARDO CHUMBINHO DE ANDRADE, CNPMF; FRANCISCO JOSE LIMA ARAGAO, CENARGEN. |
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Título: |
Molecular comparison between isolates of Cowpea severe mosaic virus and Cowpea aphid borne mosaic virus from Northeast Brazil. |
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Ano de publicação: |
2011 |
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Fonte/Imprenta: |
In: SIMPÓSIO BRASILEIRO DE GENÉTICA MOLECULAR DE PLANTAS, 3, 2011, Ilhéus. Resumos. [S. l.]: Sociedade Brasileira de Genética, 2011. pdf 34699 |
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Páginas: |
p. 6 |
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Idioma: |
Inglês |
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Conteúdo: |
Cowpea (Vigna unguiculata) is an important plant crop in Northeast Brazil being traditionally cultivated by small farmers. Virus diseases are considered to be the main factor limiting cowpea yield in the region. The severe mosaic disease caused by the Cowpea severe mosaic virus (CpSMV), family Comoviridae, genus Comovirus, seems to be one of the most prevalent diseases leading to high yield losses in this crop. The CABMV belongs to the genus Potyvirus in the Potyviridae family, and infects cowpea worldwide. In the northeastern Region of Brazil, both viruses can be found in cowpea planted areas. The aim of the present study was to access the degree of homology among a 2500 and 1500bp region of different isolates of CpSMV and CABMV, respectively; obtained in different northeastern regions in Brazil, and to compare it to isolates throughout the world. Plants with CPSMV and CABMV symptoms from the states of Piauí, Ceará, Rio Grande do Norte, Paraiba, Pernambuco, Alagoas, Sergipe and Bahia were collected, and the isolates were identified by RT-PCR analysis. Total RNA was extracted from infected tissue with Trizol Reagent (Invitrogen) according to manufacturer's recommendations, and afterwards used for synthesis of cDNA fragments by RT-PCR using the Superscript® III Reverse Polymerase and Taq DNA Polymerase (Invitrogen), according to manufacturer?s recommendations. The synthesized primers were able to amplify fragments of 2500 and 1500bp of the CpSMV and CABMV virus, respectively, by RT-PCR. Amplification products were directly cloned into the pGEMT-Easy plasmid vector (Promega), according to the manufacturer?s instructions. Cloned fragments were sequenced in both orientations. Deduced amino acid sequences of the virus were compared to sequences available from GenBank. Multiple sequence alignments were obtained with Clustal W. Phylogenetic trees using the MEGA version 4.1 software package and the neighbour-joining method with Poisson correction. Tree branches were bootstrapped with 1000 permutations. CpSMV and CABMV diseases remain as limiting factors in this crop in Brazil, and breeding programs, either by conventional or engineered approaches, should be targeted at establishing resistance of cowpeas to CpSMV and CABMV. MenosCowpea (Vigna unguiculata) is an important plant crop in Northeast Brazil being traditionally cultivated by small farmers. Virus diseases are considered to be the main factor limiting cowpea yield in the region. The severe mosaic disease caused by the Cowpea severe mosaic virus (CpSMV), family Comoviridae, genus Comovirus, seems to be one of the most prevalent diseases leading to high yield losses in this crop. The CABMV belongs to the genus Potyvirus in the Potyviridae family, and infects cowpea worldwide. In the northeastern Region of Brazil, both viruses can be found in cowpea planted areas. The aim of the present study was to access the degree of homology among a 2500 and 1500bp region of different isolates of CpSMV and CABMV, respectively; obtained in different northeastern regions in Brazil, and to compare it to isolates throughout the world. Plants with CPSMV and CABMV symptoms from the states of Piauí, Ceará, Rio Grande do Norte, Paraiba, Pernambuco, Alagoas, Sergipe and Bahia were collected, and the isolates were identified by RT-PCR analysis. Total RNA was extracted from infected tissue with Trizol Reagent (Invitrogen) according to manufacturer's recommendations, and afterwards used for synthesis of cDNA fragments by RT-PCR using the Superscript® III Reverse Polymerase and Taq DNA Polymerase (Invitrogen), according to manufacturer?s recommendations. The synthesized primers were able to amplify fragments of 2500 and 1500bp of the CpSMV and CABMV virus, respectively,... Mostrar Tudo |
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Palavras-Chave: |
CABMV; Cowpea; CpSMV; Molecular and RT-PCR analysis; Virus diseases. |
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Categoria do assunto: |
X Pesquisa, Tecnologia e Engenharia |
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Marc: |
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520 $aCowpea (Vigna unguiculata) is an important plant crop in Northeast Brazil being traditionally cultivated by small farmers. Virus diseases are considered to be the main factor limiting cowpea yield in the region. The severe mosaic disease caused by the Cowpea severe mosaic virus (CpSMV), family Comoviridae, genus Comovirus, seems to be one of the most prevalent diseases leading to high yield losses in this crop. The CABMV belongs to the genus Potyvirus in the Potyviridae family, and infects cowpea worldwide. In the northeastern Region of Brazil, both viruses can be found in cowpea planted areas. The aim of the present study was to access the degree of homology among a 2500 and 1500bp region of different isolates of CpSMV and CABMV, respectively; obtained in different northeastern regions in Brazil, and to compare it to isolates throughout the world. Plants with CPSMV and CABMV symptoms from the states of Piauí, Ceará, Rio Grande do Norte, Paraiba, Pernambuco, Alagoas, Sergipe and Bahia were collected, and the isolates were identified by RT-PCR analysis. Total RNA was extracted from infected tissue with Trizol Reagent (Invitrogen) according to manufacturer's recommendations, and afterwards used for synthesis of cDNA fragments by RT-PCR using the Superscript® III Reverse Polymerase and Taq DNA Polymerase (Invitrogen), according to manufacturer?s recommendations. The synthesized primers were able to amplify fragments of 2500 and 1500bp of the CpSMV and CABMV virus, respectively, by RT-PCR. Amplification products were directly cloned into the pGEMT-Easy plasmid vector (Promega), according to the manufacturer?s instructions. Cloned fragments were sequenced in both orientations. Deduced amino acid sequences of the virus were compared to sequences available from GenBank. Multiple sequence alignments were obtained with Clustal W. Phylogenetic trees using the MEGA version 4.1 software package and the neighbour-joining method with Poisson correction. Tree branches were bootstrapped with 1000 permutations. CpSMV and CABMV diseases remain as limiting factors in this crop in Brazil, and breeding programs, either by conventional or engineered approaches, should be targeted at establishing resistance of cowpeas to CpSMV and CABMV.
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700 1 $aARAGAO, F. J. L.
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Registro original: |
Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia (CENARGEN) |
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