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Registro Completo |
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Biblioteca(s): |
Embrapa Gado de Leite. |
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Data corrente: |
05/09/2019 |
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Data da última atualização: |
18/11/2022 |
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Tipo da produção científica: |
Artigo em Anais de Congresso |
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Autoria: |
FERNANDES, M. V. M; QUINTAO, C. C. R.; P. M. M.; SARAIVA, N. Z.; CAMARGO, L. S. de A. |
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Afiliação: |
Mariana Venturini Martins Fernandes, Unipac; CAROLINA CAPOBIANGO ROMANO QUINTAO, CNPGL; Michele Munk Pereira, UFJF; NAIARA ZOCCAL SARAIVA, CNPGL; LUIZ SERGIO DE ALMEIDA CAMARGO, CNPGL. |
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Título: |
Avaliação da complexação da proteína CAS9 e RNA-Guia com diferentes tipos de nanotubos de carbono visando à edição gênica em células e embriões de mamíferos. |
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Ano de publicação: |
2019 |
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Fonte/Imprenta: |
In: WORKSHOP DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA DA EMBRAPA GADO DE LEITE, 24., 2019, Juiz de Fora. Anais... Juiz de Fora: Embrapa Gado de Leite, 2019. |
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Páginas: |
4 p. |
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Idioma: |
Português |
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Notas: |
Editor Técnico: Leônidas Paixão Passos, Embrapa Gado de Leite. |
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Conteúdo: |
Resumo: Dentre as diversas aplicações dos nanomateriais, ressalta-se a utilização de nanotubos de carbono (NTC) como carreadores não virais de ácidos nucléicos e proteínas para o interior de células e embriões de mamíferos. Os métodos atualmente disponíveis para transfecção possuem limitações, o que estimula o desenvolvimento de métodos alternativos de carreamento de biomoléculas. O objetivo desse estudo foi avaliar a eficiência da complexação de dois tipos de NTCs, um carboxilado (MWNT-COOHs) e outro aminado (NTC- O-A), à proteína CAS9 e RNA-guia (sgRNA), para aplicações em edição gênica. Metodologia: Ambos os tipos de NTCs foram sintetizados por deposição química catalítica por vapor e caracterizados por microscopia eletrônica de transmissão (MET). Após a síntese, os NTCs foram dispersos com auxílio de agitação ultrassônica (1 minuto), em meio Optimen e preparados de acordo com os seguintes grupos: G1: 0,2 mcg/mcl MWNTC-COOH+CAS9+sgRNA; G2: 0,4 mcg/mcl MWNTC-COOH+CAS9+sgRNA; G3: 0,2 mcg/mcl NTC-O-A+CAS9+sgRNA; G4: 0,4 mcg/mcl NTC-O-A+ CAS9+sgRNA; G5: CAS9+ sgRNA; G6: 0,4 mcg/mcl MWNTC-COOH; G7: 0,4 mcg/mcl NTC-O-A. A fim de se verificar a ocorrência de complexação do NTC com a proteína CAS9 e o sgRNA, foi avaliado o potencial zeta (PZ) de todos os tratamentos, através do equipamento Zetasizer Nano ZN (Malvern, Reino Unido). Resultados: As imagens obtidas pelo MET demonstraram morfologia típica dos nanotubos de carbono. Comparando os valores de PZ nos diferentes grupos, observou-se que o PZ de G6 (-15 mV) foi maior que o PZ de G1 (-4,83 mV) e G2 (-11,38 mV) após complexação, bem como o valor de G7 (13,9 mV) foi maior que o PZ de G3 (8,98) e G4 (8,92), sugerindo que pode ter ocorrido interação dos aminoácidos da proteína CAS9 com os grupamentos funcionais do MWNT-COOH e do NTC-O-A. Conclusão: Os resultados preliminares indicam uma possibilidade de interação entre os nanotubos de carbono avaliados com a proteína CAS9 e o sgRNA, sugerindo que esse nanomaterial possui potencial para aplicações na modificação genética de células e embriões. MenosResumo: Dentre as diversas aplicações dos nanomateriais, ressalta-se a utilização de nanotubos de carbono (NTC) como carreadores não virais de ácidos nucléicos e proteínas para o interior de células e embriões de mamíferos. Os métodos atualmente disponíveis para transfecção possuem limitações, o que estimula o desenvolvimento de métodos alternativos de carreamento de biomoléculas. O objetivo desse estudo foi avaliar a eficiência da complexação de dois tipos de NTCs, um carboxilado (MWNT-COOHs) e outro aminado (NTC- O-A), à proteína CAS9 e RNA-guia (sgRNA), para aplicações em edição gênica. Metodologia: Ambos os tipos de NTCs foram sintetizados por deposição química catalítica por vapor e caracterizados por microscopia eletrônica de transmissão (MET). Após a síntese, os NTCs foram dispersos com auxílio de agitação ultrassônica (1 minuto), em meio Optimen e preparados de acordo com os seguintes grupos: G1: 0,2 mcg/mcl MWNTC-COOH+CAS9+sgRNA; G2: 0,4 mcg/mcl MWNTC-COOH+CAS9+sgRNA; G3: 0,2 mcg/mcl NTC-O-A+CAS9+sgRNA; G4: 0,4 mcg/mcl NTC-O-A+ CAS9+sgRNA; G5: CAS9+ sgRNA; G6: 0,4 mcg/mcl MWNTC-COOH; G7: 0,4 mcg/mcl NTC-O-A. A fim de se verificar a ocorrência de complexação do NTC com a proteína CAS9 e o sgRNA, foi avaliado o potencial zeta (PZ) de todos os tratamentos, através do equipamento Zetasizer Nano ZN (Malvern, Reino Unido). Resultados: As imagens obtidas pelo MET demonstraram morfologia típica dos nanotubos de carbono. Comparando os valores de PZ nos diferentes grupos, obs... Mostrar Tudo |
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Palavras-Chave: |
Complexação; Edição; Nanotubos. |
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Categoria do assunto: |
H Saúde e Patologia |
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URL: |
https://ainfo.cnptia.embrapa.br/digital/bitstream/item/201674/1/17-Avaliacao-da-complexacao-da-proteina.pdf
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Marc: |
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Registro original: |
Embrapa Gado de Leite (CNPGL) |
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Biblioteca |
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Tipo/Formato |
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Cutter |
Registro |
Volume |
Status |
URL |
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Registro Completo
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Biblioteca(s): |
Embrapa Soja. |
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Data corrente: |
24/01/2011 |
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Data da última atualização: |
03/06/2011 |
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Tipo da produção científica: |
Resumo em Anais de Congresso |
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Autoria: |
KULCHESKI, F. R.; MARCELINO, F. C.; NEPOMUCENO, A. L.; ABDELNOOR, R. V.; MARGIS, R. |
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Afiliação: |
F. R. KULCHESKI, Universidade Federal do Rio Grande do Sul, UFRGS; FRANCISMAR CORREA MARCELINO, CNPSO; ALEXANDRE LIMA NEPOMUCENO, CNPSO; RICARDO VILELA ABDELNOOR, CNPSO; R. MARGIS, Universidade Federal do Rio Grande do Sul, UFRGS. |
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Título: |
The use of microRNAs as universal reference genes in quantitative PCR. |
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Ano de publicação: |
2010 |
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Fonte/Imprenta: |
In: CONGRESSO BRASILEIRO DE GENÉTICA, 56., 2010, Guarujá. Resumos... [Curitiba]: UFPR, 2010. p. 312. |
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Idioma: |
Português |
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Conteúdo: |
Reverse transcription quantitative real-time PCR (RT-qPCR) is a robust and widely applied technique used to investigate gene expression. However, for correct analysis and interpretation of results, the choice of a suitable gene to use as an internal control is a crucial factor. These genes, such as housekeeping genes, should have a constant expression level in different tissues and across different conditions. The advances in genome sequencing have provided high-throughput gene expression analysis and have contributed to the identification of new genes, including microRNAs (miRNAs). The miRNAs are fundamental regulatory genes of eukaryotic genomes, acting on several biological functions. In this study, miRNA expression stability was investigated in different soybean tissues and genotypes as well as after abiotic or biotic stress treatments. The present study represents the first investigation into the suitability of miRNAs as housekeeping genes in plants. The transcript stability of ten miRNAs was compared to those of six previously reported housekeeping genes for the soybean. In this study, we provide evidence that miRNA expression stability can be greater than the expression stability of protein-coding genes. In addition, we conclude that miRNAs are optimal reference genes not only. |
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Thesagro: |
Soja. |
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Categoria do assunto: |
-- |
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URL: |
https://ainfo.cnptia.embrapa.br/digital/bitstream/item/25959/1/GP-312.pdf
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Marc: |
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245 $aThe use of microRNAs as universal reference genes in quantitative PCR.
260 $aIn: CONGRESSO BRASILEIRO DE GENÉTICA, 56., 2010, Guarujá. Resumos... [Curitiba]: UFPR, 2010. p. 312.$c2010
520 $aReverse transcription quantitative real-time PCR (RT-qPCR) is a robust and widely applied technique used to investigate gene expression. However, for correct analysis and interpretation of results, the choice of a suitable gene to use as an internal control is a crucial factor. These genes, such as housekeeping genes, should have a constant expression level in different tissues and across different conditions. The advances in genome sequencing have provided high-throughput gene expression analysis and have contributed to the identification of new genes, including microRNAs (miRNAs). The miRNAs are fundamental regulatory genes of eukaryotic genomes, acting on several biological functions. In this study, miRNA expression stability was investigated in different soybean tissues and genotypes as well as after abiotic or biotic stress treatments. The present study represents the first investigation into the suitability of miRNAs as housekeeping genes in plants. The transcript stability of ten miRNAs was compared to those of six previously reported housekeeping genes for the soybean. In this study, we provide evidence that miRNA expression stability can be greater than the expression stability of protein-coding genes. In addition, we conclude that miRNAs are optimal reference genes not only.
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Registro original: |
Embrapa Soja (CNPSO) |
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