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Registro Completo |
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Biblioteca(s): |
Embrapa Soja. |
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Data corrente: |
22/12/2005 |
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Data da última atualização: |
22/12/2005 |
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Autoria: |
BINDE, D. R.; CHUEIRE, L. M. O.; LUCASI. H.; NICOLÁS, M. F.; VASCONCELOS, A. T. R.; GONZAGA, L. P.; SOUZA, R. C.; MARTINEZ-ROMERO, E.; FERNANDO GOMES BARCELLOS, F. G.; SILVA, M. F.; GARCIA, J. E.; HUNGRIA, H. |
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Título: |
Seqüenciamento do plasmídeo simbiótico da estirpe CFN 299 de Rhizobium tropici. |
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Ano de publicação: |
2005 |
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Fonte/Imprenta: |
In: SEMANA DE BIOTECNOLOGIA, 1., 2005, Londrina. [Resumos]. Londrina: UEL, 2005. |
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Descrição Física: |
1 CD-ROM. |
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Idioma: |
Português |
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Notas: |
Resumo - Pdf. 41. |
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Conteúdo: |
O objetivo desse trabalho foi seqüenciar parcialmente o plasmídeo simbiótico da estirpe
CFN 299 de Rhizobium tropici, que se associa simbioticamente ao feijoeiro ( Phaseolus
vulgaris), estabelecendo o processo de fixação biológica do nitrogênio. Inicialmente foram
construídas bibliotecas "shotgun" pela fragmentação do DNA ao acaso, por nebulização, obtendo fragmentos de 500 pares de bases (pb) a2 kb. Os fragmentos foram reparados e fosforilados por Klenow da DNA polimerase de Escherichia coli e separados em gel de agarose "low melting". A seguir, foram recuperados e ligados ao vetor pUC18, digerido com a enzima de restrição SmaI-BAP e defosforilados com a enzima T4 DNA ligase. Após a ligação, o material foi utilizado para transformação por eletroporação de células de E. coli estirpe DH10B. As células foram plaqueadas em meio contendo ampicilina, IPTG e X-gal e foram crescidas durante a noite, a 37° C. Colônias brancas individuais ( clones recombinantes) foram inoculadas em meio de cultura com ampicilina e crescidas, procedendo-se ao estoque a -80% e a novo crescimento, conforme descrito, para extração do DNA, realizado pelo método de rompimento alcalino. Após a precipitação, filtragem e verificação da concentração, o seqüenciamento foi realizado pelo método dos terminadores fluorescentes, em um seqüenciador automático MegaBACE ( Amersham Pharmacia Biotech). As leituras obtidas foram submetidas a análises de bioinformática. Até o presente momento foram construídas duas bibliotecas e foram realizadas 1.325 leituras, com o depósito de 1.220.032 pb. MenosO objetivo desse trabalho foi seqüenciar parcialmente o plasmídeo simbiótico da estirpe
CFN 299 de Rhizobium tropici, que se associa simbioticamente ao feijoeiro ( Phaseolus
vulgaris), estabelecendo o processo de fixação biológica do nitrogênio. Inicialmente foram
construídas bibliotecas "shotgun" pela fragmentação do DNA ao acaso, por nebulização, obtendo fragmentos de 500 pares de bases (pb) a2 kb. Os fragmentos foram reparados e fosforilados por Klenow da DNA polimerase de Escherichia coli e separados em gel de agarose "low melting". A seguir, foram recuperados e ligados ao vetor pUC18, digerido com a enzima de restrição SmaI-BAP e defosforilados com a enzima T4 DNA ligase. Após a ligação, o material foi utilizado para transformação por eletroporação de células de E. coli estirpe DH10B. As células foram plaqueadas em meio contendo ampicilina, IPTG e X-gal e foram crescidas durante a noite, a 37° C. Colônias brancas individuais ( clones recombinantes) foram inoculadas em meio de cultura com ampicilina e crescidas, procedendo-se ao estoque a -80% e a novo crescimento, conforme descrito, para extração do DNA, realizado pelo método de rompimento alcalino. Após a precipitação, filtragem e verificação da concentração, o seqüenciamento foi realizado pelo método dos terminadores fluorescentes, em um seqüenciador automático MegaBACE ( Amersham Pharmacia Biotech). As leituras obtidas foram submetidas a análises de bioinformática. Até o presente momento foram construídas duas biblio... Mostrar Tudo |
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Categoria do assunto: |
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Marc: |
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773 $tIn: SEMANA DE BIOTECNOLOGIA, 1., 2005, Londrina. [Resumos]. Londrina: UEL, 2005.
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Registro original: |
Embrapa Soja (CNPSO) |
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| Registros recuperados : 2 | |
| 2. |  | PRADO, G. S.; ROCHA, D. C.; SANTOS, L. N. dos; CONTILIANI, D. F.; NOBILE, P. M.; MARTINATI-SCHENK, J. C.; PADILHA, L.; MALUF, M. P.; LUBINI, G.; PEREIRA, T. C.; MONTEIRO-VITORELLO, C. B.; CRESTE, S.; BOSCARIOL-CAMARGO, R. L.; TAKITA, M. A.; CRISTOFANI-YALY, M.; SOUZA, A. A. de. CRISPR technology towards genome editing of the perennial and semi-perennial crops citrus, coffee and sugarcane. Frontiers in Plant Science, v. 14, article 1331258, 2023.| Tipo: Artigo em Periódico Indexado | Circulação/Nível: A - 1 |
| Biblioteca(s): Embrapa Café. |
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